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PCR 实验室基本要求:
1、 PCR 实验室依据所使用的方法可分为试剂准备、标本制备、扩增、产物分析等三或四个区域。只是使用实时荧光PCR仪、HIV病毒载量测定仪的PCR实验室,有上述前面三个区域即可。各区域应完全独立分隔,不应有任何的空气直通。
2、标准的PCR实验室产物分析区或三个区域的后一个区域(即扩增及产物分析区),空气流向应由室外向室内,可通过在室内设置通风橱、排风扇或其他排风系统达到空气流由室外向室内流动的要求。
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PCR实验室控制防止污染环境的方法:
一、根据标准设定区域空气压力。选择全送全排的空调机机组,设置有效的中央空调通风系统,根据不同工作区域对空气压力的要求(正压或负压环境),严格保证规定的空气压力。
二、严格划分工作区域。实验区应科学划分,每一实验区应有明显的标志(例如醒目的标牌或不同的地面色调),以防止机器设备、实验试剂在不同实验区产生混淆。
三、健全完善实验室服务设施。为保证实验的顺利进行,实验室设施应尽可能完善,并根据实验的具体内容配置不同的仪器设备,如净化台、离心机、加样器等。
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PCR实验室各区功能及主要设备:试剂准备区:主要进行试剂的制备,分装和主反应混合液的制备。试剂盒用于样品制作的材料应直接运送至该区域。
样品制备区:主要进行样品的保存,核酸提取,贮存及其加入至扩增反应管和测定DNA的合成。 本区主要设备有冰箱,生物安全柜,离心机,加样器,振荡器等。本区的压力梯度要求为:相对于邻近区域为正压,PCR实验室设计,以避免从邻近区进入本区的气溶胶污染,压力一般设计为+10Pa。
扩增区:主要进行DNA扩增项目。已制备的DNA模板(来自样品制备区)的加入和主反应混合液(来自试剂准备区)制备成反应混合液等也可在本区内进行。本区主要设备有:冰箱,加样器,离心机,扩增仪等。本区的压力梯度要求为:相对于邻近区域为负压,以避免气溶从本区漏出,压力一般设计为-25Pa。
扩增产物分析区:主要进行扩增产物的测定。本区主要设备有加样器,、和水浴箱等。本区的压力梯度的要求为:相对于邻近区域为负压,以避免扩增产物从本区扩散至其它区域,压力一般设计为-25Pa。
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