胞外囊泡电镜检测-武汉科锐诺生物(图)
外泌体的组成:外泌体主要含有融合蛋白和转运蛋白、热休1克蛋白(HSP 70)、CD类蛋白以及磷脂酶和其他脂质相关蛋白,但是不同来源的外泌体的组成有差异。
外泌体的提取方式:
1、离心法:此种方法得到的外泌体量多,但是纯度不足。
2、过滤离心:这种操作简单、省时,不影响外泌体的生物活性,但同样纯度不足。
3、密度梯度离心法:用此种方法分离到的外泌体纯度较高,但是前期准备工作繁杂
4、免1疫磁珠法:这种方法可以保证外泌体形态的完整,特异性高、操作简单,但生理性盐浓度会影响外泌体生物活性。
5、色谱法:此种方法分离出的外泌体大小均一,但设备特殊,应用不广泛。
外泌体作为活1细胞分泌的含有RNA 和蛋白质的微囊泡,直径为 30-150nm之间,广泛分布于外周血、尿液、唾液、腹1水、羊水等多种体液中。研究表明,外泌体包含多种活性分子,胞外囊泡电镜检测,如蛋白质、脂肪和核酸(mRNA、miRNA 及其它非编码RNA ) 等, 能作为信号分子传递给靶1细胞,介导细胞间的物质传递与信息交流,文献报道体液中外泌体 RNA (特别是miRNA 等非编码RNA)在不同的疾病模型中存在明显的表达差异。同时,这些分子被外泌体的脂膜所包裹和保护, 能保持其原有稳定性和生物学功能, 已经成为液体活检的重要分子标志物。近年来, 外泌体已成为科研热点,其在临床上巨大的应用价值, 引起了众多研究者以及商业人士的浓厚兴趣。随着相关技术的发展, 有关外泌体在临床疾病(尤其是肿1瘤)的早期诊断、治1疗、预后及伴随诊断的应用研究正在蓬勃开展。通过高通量技术对外泌体 RNA进行测序, 可快速高1效获得外泌体RNA 的全1面信息,是疾病诊断和随访的理想手段。
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