生物组织石蜡包埋切片是组织学切片技术中应用广泛的方法。 例如(hematoxylin;h(a)ematine )— 伊红染色法 (
hematoxylin-eosin staining ) ,简称HE染色法 ,石蜡切片技术里常用的染色法之一 。(hematoxylin;h(a)ematine )染液为碱性 ,主要使细胞核内的染色质与胞质内的核酸着紫蓝色 ;伊红为酸性染料 ,主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色 。HE染色法是组织学、胚胎学、病理学教学与科研中基本、使用广泛的技术方法。
常见的生物切片,厚度一般在几微米的程度,病理切片技术服务,这种厚度制作起来比较简单,除了可以使用自动化的设备来切片之外,手动操作也能切到这种厚度,而且完够满足光学显微镜下观察的标准。不过在前沿的科研领域里,需要观察更细微的细胞结构,甚至需要从分子的层面来进行研究,这时候就需要用到电子显微镜。然而电子显微镜也需要更薄的样品,切片至少要达到0.1微米的厚度,而这种切片也就被称为是超薄切片,在很多实验研究里需要厚度达到50纳米,显然手I操作是无法达到这种厚度的。那么在实验环境下是怎样做成这种超薄生物切片的呢?首先是需要进行更好的固定,因为在如此薄的尺度之下,不但基本的细胞结构都已经被完全破坏,而且其中的细胞器也都被切开,里面的生物酶会释放出来,并且在很短的时间内使细胞结构遭到破坏。所以就需要在取得样品之后尽快进行固定,要求在一-分钟之 内完成这项操作,然后再使用对应的材料来做透明化以及包埋,接下来还需要配合的切片机来完成切片的过程,从而达到理想的厚度。
石蜡包埋呢是现在病理技术中很常规的一种服务项目,而石蜡包埋的实验目的就是掌握石蜡包埋实验技术;理解组织脱水、透明及浸蜡原理;熟悉不同组织的结构特点。
而石蜡包埋实验需要用到的主要试剂有:0.85%生理盐水,75%酒精,85%酒精,95%酒精,溶液,无水乙醇,48℃-60℃的石蜡。
有人注意到石蜡包埋会使用反复用过的石蜡,这是因为石蜡在刚出厂时其密度比较疏松,经过反复多次融化和冷却后的石蜡密度会增加,可以更贴近包埋组织的密度以及硬度,在进行包埋组织时不易造成蜡块的脱裂。所以一般在使用新蜡之前会在熬一下。
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