外泌体测序检测-武汉科锐诺生物(在线咨询)






外泌体miRNA的主要优势:

1.外泌体是由活1细胞分泌的,代表了活1细胞内部的状态与通信信息输出,因此是较好的诊断疾病的生物标志物的载体;

2.miRNA装入外泌体或微囊泡中,有包膜包被,可保护不被降解,稳定存在于体液中;

3.外泌体在大部分体液中均存在,可反应人体的正常生理和病理状态。

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外泌体是由细胞分泌的纳米级膜性小囊泡,直径约30~150nm。外泌体来源多样,广泛存在并分布于各种生物液体中,富含来源细胞的蛋白质、脂质和核酸,参与细胞间的信息交流。不同病理和生理条件下,外泌体的内容物不尽相同,因此外泌体可以很好地反映生物体的疾病与健康状态。此外,外泌体特殊的膜结构能够保护其内容物如RNA(microRNA、mRNA、lncRNA、circRNA)免受酶的降解,保证其能在各类体液中被稳定检测到,因此外泌体是研究各种疾病的良好生物学材料,可作为肿1瘤潜在的biomarker和治1疗靶点,亦可作为基因/药1物的递送载体,在疾病的诊断和治1疗方面具有广阔的应用前景。



外泌体分离提取方案。主要方案包括:

1、差速超1速离心法;

适用于细胞上清、灌洗液、尿液等大体积的样品;

2、基于PEG沉淀原理的试剂盒法;

适用于血1清、脑脊液等小体积的样品;

3、超滤提取法;

适用于细菌培养液或外泌体含量较低的样品浓缩。亦可搭配超1速离心法,外泌体测序检测,做进一步的提取。


外泌体是细胞外囊泡的一种,其膜来源与粒径范围与细胞外囊泡相似,电镜下,显示出典型的茶托状超微结构。实际操作中,通过常规的单一的方法很难鉴定外泌体。鉴定外泌体需要包含形态、粒径、表面分子标记物等多方面的鉴定。具体方法包括:透射电镜(形态鉴定)、NTA检测(粒径及浓度鉴定)、WB(分子标志物)。NTA检测作为外泌体鉴定的经典方法之一,可同时反映出检测样品的浓度及粒径。质量较好,纯度较高的外泌体样品,粒径分布在30-150nm,原液浓度在10^9左右。为了保证检测质量,对每一个样品,都会进行3次技术重复。检测周期为2-3个工作日,可当天到样当天出结果。







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