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PCR实验室的设计规范
1、区域布局合理
PCR扩增试验室原则上分为4个独立的工作区,即试剂准备区、样品处理区、核酸扩增区、产物分析区。为避免交叉污染,必须严格按照单一方向进入每个工作区,每个实验区之间的试剂和样品转移应通过转移窗口进行。
2、标准的三区分隔
PCR过程可分为试剂制备、标本制备和PCR扩增检测三个独立的实验区,整个实验区设置有一个整体缓冲走廊,每个独立的实验区都设有一个缓冲区。
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PCR实验室控制防止污染环境的方法:
实验操作标准化
1、临床医学基因扩增检验实验室的技术人员必须进行入岗学习,学习合格后方可从事临床医学基因扩增检验工作;
2、在整个实验过程中,操作者一定要戴好手套,定期更换手套。另外,在实际操作中应用一次性帽子也是合理避免环境污染的一种对策;
3、清理工作要及时,得当。实验结束后,一定要立即对现场进行清理,除了用基本的消菌液对实验室表面进行擦洗消菌或紫外线灯直接消菌外,还要对一些实验仪器进行高电压消菌。
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PCR实验室各区功能及主要设备:试剂准备区:主要进行试剂的制备,分装和主反应混合液的制备。试剂盒用于样品制作的材料应直接运送至该区域。
样品制备区:主要进行样品的保存,核酸提取,贮存及其加入至扩增反应管和测定DNA的合成。 本区主要设备有冰箱,PCR实验室建设,生物安全柜,离心机,加样器,振荡器等。本区的压力梯度要求为:相对于邻近区域为正压,以避免从邻近区进入本区的气溶胶污染,压力一般设计为+10Pa。
扩增区:主要进行DNA扩增项目。已制备的DNA模板(来自样品制备区)的加入和主反应混合液(来自试剂准备区)制备成反应混合液等也可在本区内进行。本区主要设备有:冰箱,加样器,离心机,扩增仪等。本区的压力梯度要求为:相对于邻近区域为负压,以避免气溶从本区漏出,压力一般设计为-25Pa。
扩增产物分析区:主要进行扩增产物的测定。本区主要设备有加样器,、和水浴箱等。本区的压力梯度的要求为:相对于邻近区域为负压,以避免扩增产物从本区扩散至其它区域,压力一般设计为-25Pa。
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