1、组织取材：组织取材应尽可能新鲜。由于组织RNA降解较快，tunel检测技术服务，所以新鲜组织和培养细胞在30 min 内固定。

       2、细胞组织固定目的与注意事项：

       （1）保持细胞结构；

       （2）大限度地保持细胞内DNA或RNA的水平；

       （3）使探针易于进入细胞或组织。

        常用的固定剂是多聚甲醛，与其它醛类固定剂不同，多聚甲醛不会与蛋白质产生广泛的交叉连接，因而不会影响探针穿透入细胞或组织。

原位末端凋亡检测（Tunel）

实验原理： TUNEL技术可对组织或细胞中凋亡小体或单个凋亡细胞进行染色，能准确反映细胞凋亡典型的生物化学和形态特征。凋亡细胞内内源性核酸内切酶被而将自身染色体DNA切断成缺口或3-OH末端片段这一特点，利用脱氧核苷酸末端转移酶将标有标记物(如，生物素或荧光素)的脱氧核苷酸转移到3-OH末端，再用组化法或荧光检测凋亡细胞。

原理

根据抗原反应和化学显色原理，组织切片或细胞标本中的抗原先和一抗结合，再利用一抗与标记生物素、荧光素等的二抗进行反应，前者再用标记辣根过氧化物酶（HRP）或碱性磷酸酶（AKP）等的抗生物素（如链霉亲和素等）结合，后通过呈色反应或荧光来显示细胞或组织中化学成分，在光学显微镜或荧光显微镜下可清晰看见细胞内发生的抗原反应产物，从而能够在细胞爬片或组织切片上原位确定某些化学成分的分布和含量。

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