石蜡包埋切片实验基本步骤主要有以下几步:
1、取材:新鲜组织固定于4%多聚甲醛24h以上。将组织从固定液取出在通风橱内用手术刀将目的部位组织修平整,将修切好的组织和对应的标签放于脱水盒内。
2、脱水:将脱水盒放进吊篮里于脱水机内依次梯度酒精进行脱水。75%酒精4h-85%酒精2h-90%酒精2h-95%酒精1h-无水乙醇I 30min-无水乙醇II 30min-醇苯5-10min-I5-10min-II5-10min-蜡I1h-蜡II1h-蜡III 1h。
3、包埋:将浸好蜡的组织于包埋机内进行包埋。先将融化的蜡放入包埋框,植物番红固绿染色测试服务,待蜡凝固之前将组织从脱水盒内取出按照包埋面的要求放入包埋框并贴上对应的标签。于-20°冻台冷却,蜡凝固后将蜡块从包埋框中取出并修整蜡块。
4、切片:将修整好的蜡块置于石蜡切片机上切片,片厚4μm。切片漂浮于摊片机40℃温水上将组织展平,用载玻片将组织捞起,并放进60℃烘箱内烤片。待水烤干蜡烤化后取出常温保存备用。
病理技术服务中病理切片作为一种实验技术已广泛应用于科研、教学、病理检验等工作中,具有较高的使用价值。那么问题来了,常见的病理切片有哪些呢?跟着科锐诺一起来了解一下吧。
切片可分为石蜡切片和冰冻切片两种形式,下面科锐诺生物给大家简单介绍一下:
石蜡切片:常用于观察正常细胞组织的形态结构,是病理学用以研究、观察及判断细胞组织形态变化的主要方法。
冰冻切片:是一种在低温条件下使组织快速冷却到一定硬度,然后进行切片的方法。因其制作过程较石蜡切片快捷、简便,而多应用于手术中的快速病理诊断。
常见的生物切片一般有三种,徒手切片、石蜡切片、火棉胶切片三种。徒手切片法简单省时间,容易掌握,虽有局限性,石蜡切片法所使用的支持剂是石蜡,优点是切下的片子薄而匀,还能作连续切片,但制作手续较复杂,具体可分为固定、冲洗、脱水、染色、浸蜡、切片、透明和封藏八步进行操作。火棉胶切片法所使用的支持剂是火棉胶。这种方法的优点是包埋过程不经高温,可以避免组织收缩及变脆,适用精细材料(如脑)的切片,适于大块组织及多空洞的组织(如脑、眼球)的切片。
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