柠檬酸的发酵因、工艺、原料而异，但在发酵过程中还需要掌握一定的温度、通风量及pH值等条件。一般认为，黑曲霉适合在28～30℃时产酸。温度过高会导致菌体大量繁殖，糖被大量消耗以致产酸降低，同时还生成较多的草酸和葡萄糖酸；温度过低则发酵时间延长。微生物生成柠檬酸要求低pH，适pH为2～4，这不仅有利于生成柠檬酸，柠檬酸销售，减少草酸等杂酸的形成，同时可避免杂菌的污染。

柠檬酸生成和菌体形态有密切关系，若发酵后期形成正常的菌球体，有利于降低发酵液粘度而增加溶解氧，因而产酸就高；若出现异状菌丝体，而且菌体大量繁殖，造成溶解氧降低，柠檬酸，使产酸迅速下降。发酵液中金属离子的含量对柠檬酸的合成有非常重要的作用，过量的金属离子引起产酸率的降低，由于铁离子能刺激乌头酸水合酶的活性，从而影响柠檬酸的积累。柠檬酸发酵用的糖蜜原料。

柠檬酸是一种晶体，无色半透明或白色，没有气味，易溶于水和乙醇。

小学科学课中一般在制作酸性饮料或汽水时使用柠檬酸，因为它对人体无害，而且真的够酸！与小苏打接触后能产生大量的二氧化碳气体。我们要利用的就是两点：酸味、二氧化碳气体。

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