包埋是使浸透蜡的组织块包裹在石蜡中。
6.切片:切片前先将蜡块切面在冻台上冷冻几分钟,将所要切的包埋块固定在标本台上,使包埋块外切面与标本夹截面平行,植物根石蜡切片检测服务,并让包埋块稍露出一截。将刀台推至外缘后松开刀片夹的螺旋,上好刀片,使切片刀平面与组织切面间呈15°左右的夹角,包埋块上下边与刀口平行。
在微动装置上调节切片要求的厚度(一般为4微米),调节时应注意指针不可在两个刻度之间,否则容易损伤切片机,将刀台移至近标本台处,让刀口与组织切面稍稍接触,这时就可以开始切片了。保存条件:室温干燥保存,一年内有效。
使用说明:
封片方法很简单,在载玻片中央滴2-3 滴树胶液(注意要滴在-起否则容易有气泡),然后把盖玻片慢慢放上去,轻轻挤压,树胶液会向外侧扩散至整个镜片,通风晾几个小时后用棉球粘上透明剂或者把镜片边缘多余的树胶擦洗干净。然后再放在通风处晾干,封片可常温保存。
注意事项:
透明剂有毒,避免与皮肤或眼睛接触。HE病理片子全景扫描提醒:封片时请注意通风。中性树胶透明度高,几乎和光学玻璃一样清晰,不腐蚀玻璃,因糨它是中性的,而玻璃怕碱性,如果不放心的可以在粘合以前用盐酸酒精泡泡晾干再粘可能会更好哦。
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石蜡包埋切片实验基本步骤主要有以下几步:
1、取材:新鲜组织固定于4%多聚甲醛24h以上。将组织从固定液取出在通风橱内用手术刀将目的部位组织修平整,将修切好的组织和对应的标签放于脱水盒内。
2、脱水:将脱水盒放进吊篮里于脱水机内依次梯度酒精进行脱水。75%酒精4h-85%酒精2h-90%酒精2h-95%酒精1h-无水乙醇I 30min-无水乙醇II 30min-醇苯5-10min-I5-10min-II5-10min-蜡I1h-蜡II1h-蜡III 1h。
3、包埋:将浸好蜡的组织于包埋机内进行包埋。先将融化的蜡放入包埋框,待蜡凝固之前将组织从脱水盒内取出按照包埋面的要求放入包埋框并贴上对应的标签。于-20°冻台冷却,蜡凝固后将蜡块从包埋框中取出并修整蜡块。
4、切片:将修整好的蜡块置于石蜡切片机上切片,片厚4μm。切片漂浮于摊片机40℃温水上将组织展平,用载玻片将组织捞起,并放进60℃烘箱内烤片。待水烤干蜡烤化后取出常温保存备用。
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