湖北荧光原位杂交-贝科新肽科技公司







原位杂交第三天

1)        用1ml含10%热灭清的MABT溶液置换溶液,放置摇床上25分钟,然后用1mlMABT置换,25分钟,再用1mlMABT溶液置换,一小时以上,后用1mlMABT溶液置换,25分钟。

2)        用1ml 1mM左旋米睉的Staining buffer洗三次,每次放置五分钟。

3)将胚胎转入十六孔板中,吸去staining buffer,加上300ul BM Purple AP Substrate(底物,用之前加5mM左旋米唑),十六孔板外面包上锡箔纸以避光,避免摇动,室温下显色。

4)每隔一小时观察胚胎是否开始显色

5)将显色完全的胚胎中的底物吸出,用PBST洗两三次后加上4%多聚甲醛固定,拍照。

6)4C冰箱保存。






原位杂交技术在其他生物领域也有广泛的应用,例如:

植物学研究:在植物学研究中,原位杂交技术可以用于检测和定位特定基因的表达,研究基因组结构和进化。此外,还可以应用于植物染色体组型分析、基因组印记研究等方面。

微生物学研究:在微生物学领域,原位杂交技术可以用于研究细菌、病毒等微生物的基因表达和定位,以及它们在环境中的分布和相互作用。例如,通过标记特异性探针,荧光原位杂交,可以检测肠道微生物群落中的特定,研究其在人体健康和疾病发生中的作用。




植物组织原位杂交的步骤包括以下几个方面:

1. 制备组织样品:从植物中取出需要研究的组织样品,如根、茎、叶等。

2. 固定组织样品:将组织样品固定在载玻片上,通常使用或乙醇等化学物质进行固定。

3. 处理组织样品:对固定的组织样品进行脱水、透明化、脱脂等处理,以便于DNA探针的穿透和结合。

4. 制备DNA探针:根据需要研究的基因序列,设计并合成DNA探针。DNA探针可以标记荧光染料或性同位素,以便于检测。

5. 杂交DNA探针:将DNA探针与组织样品进行杂交,通常需要在高温下进行,以便于DNA探针与RNA或DNA结合。

6. 检测杂交信号:通过荧光显微镜或计数器等设备,检测DNA探针与RNA或DNA的结合情况,确定目标基因的表达模式和位置。






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