科锐诺(查看)-染色体原位杂交技术服务






随着分子病理技术的蓬勃发展,越来越多的疾病相关分子改变被发现并逐步应用于临床实践中。自21世纪以来,分子病理诊断逐渐受到我国病理学工作者的认可和重视,并逐步在大医院病理科开展起来,特别是在遗传性疾病、感1染性疾病、肿1瘤等方面分子病理诊断已取得了长足的进步。 目前,我国已稳定开展的分子病理技术主要有显色原位杂交、荧光原位杂交、PCR、荧光定量PCR、基因芯片和DNA测序技术。



原位杂交第二天

1.

1)将探针回收,放于-20C保存(通常探针可重复使用十次左右)。

2)加入50%甲酰胺/2XSSCT溶液1毫升,60℃,放置30分钟,染色体原位杂交技术服务,重复一次。

3)置换2XSSCT1ml,60℃,放置15分钟。

4)置换0.2XSSCT1ml,60℃,放置30分钟,重复一次。

2.

1)用MABT洗两次,每次五分钟,放在摇床轻轻摇动。

2)室温下加1ml 1:2:7溶液,时间为一小时。

3)按1:3000的比例在1:2:7溶液中加入酶连,4C 冰箱过夜。



原位杂交第三天

1) 用1ml含10%热灭清的MABT溶液置换溶液,放置摇床上25分钟,然后用1mlMABT置换,25分钟,再用1mlMABT溶液置换,一小时以上,后用1mlMABT溶液置换,25分钟。

2) 用1ml 1mM左旋米睉的Staining buffer洗三次,每次放置五分钟。

3)将胚胎转入十六孔板中,吸去staining buffer,加上300ul BM Purple AP Substrate(底物,用之前加5mM左旋米唑),十六孔板外面包上锡箔纸以避光,避免摇动,室温下显色。

4)每隔一小时观察胚胎是否开始显色

5)将显色完全的胚胎中的底物吸出,用PBST洗两三次后加上4%多聚甲醛固定,拍照。

6)4C冰箱保存。



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