抗原提呈中外泌体的作用

树突状细胞是免1疫系统中分泌外泌体活跃的细胞。树突状细胞是抗原提呈细胞的一种，能通过吞噬入1侵体内的细菌等异物，在切断抗原肽后，外泌体电镜检测，与 MHCⅡ类分子结合并提呈在细胞表面来激1活T细胞。细胞内的抗原肽利用MHCⅠ类分子提呈，树突状细胞分泌的外泌体携带MHCⅠ类和Ⅱ类分子，它们分别与抗原特异性CD8+ 细胞杀伤性T细胞、CD4+ 辅助T细胞的T细胞受体结合，在远离树突状细胞处也可以激1活T细胞。

在透射电镜基础上，用外泌体标记蛋白对外泌体进行免1疫标记，利用胶体金标记出外泌体表面的特定抗原的位置。结合透射电镜形态学定性的特点，同时确定外泌体标记蛋白的位置。这样同时从形态学及免1疫学原理上验证外泌体。这样数据结果中既可以获得经典形态的外泌体，又可以定性及定位外泌体表面的标志蛋白。这样具有更充分的说服力。



iTRAQ (isobarictags for relative and absolute quantitation，同位素标记相对和绝1对定量)是由AB SCIEX公司研发的一种体外同重同位素标记的相对与绝1对定量技术。该技术使用8种（或4种）不同的同位素试剂来同时标记和比较8种（或4种）不同的蛋白质样品。这些试剂由3个不同的化学标签组成：报告部分，肽反应部分和平衡部分。报告部分为客户可按需选择标记个数，肽反应基团将iTRAQ标签与肽段的N-端基团和每个赖氨酸侧链相连，可标记所有酶解肽段，平衡部位可保证iTRAQ试剂标记的不同样本的同一肽段具有相同的质荷比，因此改变任一iTRAQ试剂，不同同位素在标记同一多肽后在一级质谱检测，分子量都完全相同。而在串联质谱中，同重元素标记肽段平衡基团在二级质谱发生中性丢失。信号离子表现为不同质荷比的峰，因此，根据波峰的高度及面积，可以得到蛋白质的定量信息。



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