样本准备
1. 提供外泌体悬液即可,胞外囊泡电镜测试服务,未纯化样本也可以上机检测;
注意:NTA仅提供粒径分布情况和颗粒浓度,无法区分外泌体与非外泌体成分;当然也可先利用外泌体特异性标记物进行荧光标记,则可以获知外泌体特定亚群的含量。
2.仪器的检测区间是10^7 particles/ml,且有浓度检测下限,为10^5 particles/ml,进样量不少于2ml;一般来说,会对样本稀释后进样;
我司无法准确建议送样量;检测需要量与样本本身浓度有关,样本浓,则用量小,反之则多,根据检测经验,样本取用量一般在2μl-100μl不等,取用量大于50μl时大多由于样本分泌量过低、提取失败或者对样本有过多稀释。一般建议送样量不低于30μl,如样本珍贵,可联系我司寄回,运费视具体情况收取。
外泌体可通过多种小分子进行修饰,因此逐渐成为递送治1疗药1物的有效载体。研究发现,GRP78 在索拉菲尼耐药癌细胞中,相对于索拉菲尼敏感癌细胞中显著过表达,因此,可能是 HCC 治1疗的潜在靶点。
在这项研究中,锦州医学院赵亮课题组通过修饰 BM-MSCs 以表达外泌体 siGRP78,证明了 siGRP78 修饰的外泌体与索拉1非尼联合能够靶向肝细胞癌细胞中的 GRP78 并抑制其生长和体外癌细胞的侵袭。此外,siGRP78 修饰外泌体与索拉1非尼联合也抑制体内癌细胞的生长和转移。证明了 siGRP78 修饰的外泌体可以使索拉1非尼耐药的癌细胞对索拉1非尼敏感并逆转耐药性。
外泌体分离提取方案。主要方案包括:
1、差速超1速离心法;
适用于细胞上清、灌洗液、尿液等大体积的样品;
2、基于PEG沉淀原理的试剂盒法;
适用于血1清、脑脊液等小体积的样品;
3、超滤提取法;
适用于细菌培养液或外泌体含量较低的样品浓缩。亦可搭配超1速离心法,做进一步的提取。
外泌体是细胞外囊泡的一种,其膜来源与粒径范围与细胞外囊泡相似,电镜下,显示出典型的茶托状超微结构。实际操作中,通过常规的单一的方法很难鉴定外泌体。鉴定外泌体需要包含形态、粒径、表面分子标记物等多方面的鉴定。具体方法包括:透射电镜(形态鉴定)、NTA检测(粒径及浓度鉴定)、WB(分子标志物)。NTA检测作为外泌体鉴定的经典方法之一,可同时反映出检测样品的浓度及粒径。质量较好,纯度较高的外泌体样品,粒径分布在30-150nm,原液浓度在10^9左右。为了保证检测质量,对每一个样品,都会进行3次技术重复。检测周期为2-3个工作日,可当天到样当天出结果。
胞外囊泡电镜测试服务-科锐诺(推荐商家)由武汉科锐诺生物科技有限公司提供。胞外囊泡电镜测试服务-科锐诺(推荐商家)是武汉科锐诺生物科技有限公司今年新升级推出的,以上图片仅供参考,请您拨打本页面或图片上的联系电话,索取联系人:王经理。