线粒体三维重构测试服务-科锐诺生物科技
石蜡包埋切片实验基本步骤主要有以下几步:
1、取材:新鲜组织固定于4%多聚甲醛24h以上。将组织从固定液取出在通风橱内用手术刀将目的部位组织修平整,将修切好的组织和对应的标签放于脱水盒内。
2、脱水:将脱水盒放进吊篮里于脱水机内依次梯度酒精进行脱水。75%酒精4h-85%酒精2h-90%酒精2h-95%酒精1h-无水乙醇I 30min-无水乙醇II 30min-醇苯5-10min-I5-10min-II5-10min-蜡I1h-蜡II1h-蜡III 1h。
3、包埋:将浸好蜡的组织于包埋机内进行包埋。先将融化的蜡放入包埋框,待蜡凝固之前将组织从脱水盒内取出按照包埋面的要求放入包埋框并贴上对应的标签。于-20°冻台冷却,蜡凝固后将蜡块从包埋框中取出并修整蜡块。
4、切片:将修整好的蜡块置于石蜡切片机上切片,片厚4μm。切片漂浮于摊片机40℃温水上将组织展平,用载玻片将组织捞起,线粒体三维重构测试服务,并放进60℃烘箱内烤片。待水烤干蜡烤化后取出常温保存备用。
病理切片的制作步骤注意事项:
大小标本必须分开处理,大标本固定时间不得少于6小时;小标本不得少于3小时。
固定液必须及时更换,固定后必须流水冲洗。根据切片量化的控制,专人负责更换药剂,以保证每一批切片的质量恒定。
固定、脱水温度不得高于37℃。
包埋用石蜡必须过滤。
试剂必须及时更换。
切片刀必须锋利,用力均匀,切片厚度3—5微米。切片完整无污染,无皱褶。
胃镜、穿刺等小活检组织切片必须作连续性切片,数量不得少于8张。
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