TCEP 溶液,0.5M细菌的培养和收集:将含有质粒pBS的DH5α接种在LB固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12小时至对数生长后期。
TCEP 溶液,0.5M质粒DNA少量快速提取:质粒DNA小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA十分有用。这些方法共同特点是简便、快速,能同时处理大量试样,所得DNA有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。
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磷酸三(2-氯已基)酯降解菌的降解条件优化研究
采用H-1菌株降解有机磷系阻燃剂磷酸三(2-氯已基)酯(TCEP),通过单因素试验和正交试验对降解条件进行优化,得到TCEP的佳生物降解条件:温度为30℃、p H为7.0、培养时间为7 d、TCEP初始浓度为20 mg/L,此条件下TCEP的降解率达到大,还原剂tcep供应商,为86.00%。其中,温度对TCEP降解的影响zui大,还原剂tcep 溶液,其次是TCEP的初始浓度及p H,还原剂tcep多少钱,培养时间的影响小。
TCEP 溶液,0.5M(一)、煮沸法1、将1.5ml培养液倒入eppendorf管中,4℃下12000g离心30秒。2、弃上清,将管倒置于卫生纸上几分钟,肇庆还原剂tcep,使液体流尽。3、将菌体沉淀悬浮于120ml STET溶液中, 涡旋混匀。4、加入10ml新配制的溶菌酶溶液(10mg/ml), 涡旋振荡3秒钟。5、将eppendorf管放入沸水浴中,50秒后立即取出。6、用微量离心机4℃下12000g离心10分钟。7、用无菌牙签从eppendorf管中去除细菌碎片。8、取20ml进行电泳检查。
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