全自动核酸提取仪的作用
随着分子生物学技术的高速发展,全自动核酸提取仪多少钱,以核酸杂交、核酸扩增及核酸序列分析等为代表的分子诊断和检测技术的重要作用日益凸显。样品前处理所花费的时间占整个分析过程的60%,而检测误差的90%出现在前处理领域。核酸提取作为分子诊断实验关键的一步,其获得的核酸质量优劣直接影响到下游分子生物学试验的成败。
全自动核酸提取仪——类型介绍
磁珠法自动核酸提取仪又分为磁棒法和抽吸法
先说抽吸法:顾名思义,抽吸法就是通过自动移液装置来进行,通过自动移液装置来加入裂解液、磁珠吸附;抽走裂解液,加入漂洗液,磁珠吸附,抽走漂洗液,加入洗脱缓冲液。从步骤上好像没什么问题,但是抽吸法的问题在于,为了在去除废液的时候不抽走磁珠,移液器不能靠磁珠太近,以防磁珠连同废液被抽掉,这样每一次抽废液的时候总有一小部分不能完全的抽走,特别是磁铁在底部的装置,因为磁珠被磁铁吸附在底部,所以移液器不能靠底部太近,这样漂洗液就不能完全去除,残留的漂洗液中的盐和乙醇会影响后面的洗脱效率和PCR成功率;磁铁在侧面的装置残留的液体会少些,全自动核酸提取仪生产厂家,但是洗脱的效率也不好,依靠DNA自行溶解到洗脱缓冲液中,全自动核酸提取仪哪家好,除非等上半小时以上,所以有些96自动核酸提取工作站,提取一轮的时间需要150分钟,32磁棒法的同样的时间可以提5轮了。
再说磁棒法核酸提取仪:通量通常有8、16、32、96通道,相对于抽吸法,磁棒法的优点是每一步的液体不残留,因为磁棒只带走磁珠,转移到下一个步骤相应的反应孔中,全自动核酸提取仪,另外选择磁棒法的提取仪器尽量要功能更齐全的,比如可以加热,每个加热槽独立温控,这样可以设置加热、裂解、洗脱的不同温度,另外很重要的一点是,带动磁棒的电机要能带动磁棒进行液体的快速混匀和搅拌,这样才有利于自动化和有助于裂解和漂洗。磁棒法的通量选择尽量是32通道,96通道的看似通量更高,但是有个很现实的问题,96个磁力棒在从一个板转移至另外一个板的时候,磁力棒上面的液体中途滴下来怎么办,它会滴到别的孔中造成污染,而32通道的磁力棒运行轨迹不经过其他样本的上空,这样不会交叉污染。
全自动核酸提取仪如何操作呢?
核酸提取仪配套试剂及其操作步骤,买了仪器后一定要考虑后续使用配套试剂的问题:
1)配套试剂是否齐全。不同样本类型的提取试剂盒产品链是否完整
2)配套试剂是不是预封装。非预封装的试剂需要实验员用移液器加入裂解液、洗涤液和洗脱液等试剂,并没有减少人工操作时间;
3)提取前除了加样本外。是否需要添加蛋白酶K,由于有些公司并没有掌握裂解液中预封装蛋白酶K且常温储存的技术,蛋白酶K需要-20℃单独保存,需即用即加。每个样本多加一步蛋白酶K,96个样本多了10~15min左右的操作时间。
4)配套试剂的保存温度。有些厂家的提取试剂需要在2—8℃运输保存,冷链运输增加运输成本,保存需要在冰箱中,而预封装提取试剂体积较大,在用量大特别像新冠这样大批量的使用,完全没有足够冰箱可以进行一段时间试剂的储存空间。
5)提取后的扩增效率。提取核酸时观察磁珠残留率并且检测提取核酸质量!
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