贝科新肽(图)-染色体荧光原位杂交-原位杂交







荧光原位杂交(FISH)技术具有以下优点:

可多重染色:利用不同的荧光染料标记不同的探针,可以实现多重荧光原位杂交,从而同时检测多个序列,提高实验效率了。

高度创新性和性:FISH技术不仅可以用于研究已知基因或序列的染色体定位,还可以用于未基因或遗传标记及染色体畸变的研究,在基因定性、定量、整合、表达等方面的研究中颇具优势。




DNA 探针为原位杂交提供较高的灵敏度。与RNA探针相比,DNA探针与靶mRNA 分子的杂交强度较弱,因此在杂交后的洗涤中不应使用甲醛。

探针特异性至关重要。如果已知细胞中mRNA或DNA的确切核苷酸序列,则可据此设计高度的互补探针。如果超过 5% 的碱基对不互补,那么探针只能与靶序列发生轻度杂交。这意味着,染色体荧光原位杂交,探针更容易在洗涤和检测步骤中被洗去,可能无法正确检测。





植物组织原位杂交的步骤包括以下几个方面:

1. 制备组织样品:从植物中取出需要研究的组织样品,如根、茎、叶等。

2. 固定组织样品:将组织样品固定在载玻片上,通常使用或乙醇等化学物质进行固定。

3. 处理组织样品:对固定的组织样品进行脱水、透明化、脱脂等处理,植物原位杂交,以便于DNA探针的穿透和结合。

4. 制备DNA探针:根据需要研究的基因序列,设计并合成DNA探针。DNA探针可以标记荧光染料或性同位素,原位杂交,以便于检测。

5. 杂交DNA探针:将DNA探针与组织样品进行杂交,通常需要在高温下进行,以便于DNA探针与RNA或DNA结合。

6. 检测杂交信号:通过荧光显微镜或计数器等设备,检测DNA探针与RNA或DNA的结合情况,确定目标基因的表达模式和位置。






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