湖北原位杂交-武汉贝科新肽公司-原位杂交技术咨询







植物原位杂交在遗传育种方面的应用主要包括:

异源染色质及多种染色体畸变检测:通过远缘杂交把有用遗传物质基因的异源染色质渐渗到植物中。如带有几种抗病基因的黑麦1R染色体已被整合到许多高产的小麦品种中。原位杂交技术则是鉴定外源染色体(质)的有效手段。

基因组印记研究:基因组印记是指一个基因的两条染色体上的DNA序列存在差异。通过植物原位杂交技术,可以检测到基因组印记的存在和分布,从而帮助确定基因组的进化、遗传和功能特征。




原位杂交技术的实验结果

原位杂交技术的实验结果包括阳性信号和阴性信号的判断标准。阳性信号是指探针与目标核酸序列特异性结合形成的双链复合物,在显色反应、荧光染色或性同位素标记下呈现出明显的信号。阴性信号是指探针未与目标核酸序列结合,不呈现任何信号。实验结果的分析需要结合探针的特异性和敏感性、组织或细胞的原始结构以及实验条件等因素综合进行。




一. 原位杂交天

1. 重新水化和固定

1) 吸取固定好的胚胎,加入50%的PBST溶液,放置5分钟。

2) 置换成30%的PBST溶液,放置5分钟

3) 置换成PBST溶液,放置5分钟,湖北原位杂交,重复一次

4) 置换成4%多聚甲醛的PBS溶液固定20分钟

5) 用PBST洗两次,每次放置五分钟,室温。

 蛋白酶处理与后固定(本实验不做此步)

1) 用10ul/ml的蛋白酶K在室温下处理胚胎。5体节以下的胚胎不处理,5体节到24小时的胚胎处理3分钟,24小时以上的胚胎处理5分钟或者更长。发育时间越短的胚胎越嫩,可以不用或者少用蛋白酶处理,发育时间长的胚胎就需要用蛋白酶来疏松组织,以便于杂交。

2) 用PBST溶液轻洗,在PBST中放置5分钟。

3) 用4%多聚甲醛的PBS溶液固定20分钟,原位杂交技术咨询,室温。

4) 用PBST洗两次,每次放置五分钟,室温。






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