T细胞的ELISpot分析应用:
B细胞ELISpot分析是分析Antibody免疫反应的有力工具,并且是仅有的少数能直接聚焦于Antibody分泌细胞(ASC)的分析方法之一。 这种J为灵敏的方法使研究人员能够识别样品中的ASC,并测量其总数以及那些对特定抗原分泌Antibody的数量。
例如,酶联免疫斑点测定,B细胞ELISpot可以揭示血液中长期记忆B细胞的数量,这是无法用其他方法评估的。B细胞ELISpot的主要应用包括检测B细胞对感染的反应和vaccine引发的反应。
酶联免疫斑点技术(Enzyme Linked Immunospot Assay,简称ELISPOT)
是细胞免疫学研究中更敏感的检测方法,可以在单细胞水平对Antibody分泌细胞(ASC)及细胞因子(CK)分泌细胞进行检测,比ELISA和有限稀释法等具有更髙的灵敏性,能从20万-30万细胞中检岀1个分泌该蛋白的细胞。并且该方法能够对抗原刺激后的Living cells进行功能性检测,具有较髙的特异性、直观可信度髙,并且易操作,已被广泛用于分泌CK细胞检测或ASC测定中,酶联免疫斑点测定生产厂家,在国内外免疫学界获得了广泛的应用。
ELISPOT实验步骤
淋巴细胞受到抗原刺激后局部产生细胞因子,此细胞因子被ELISPOT板底PVDF膜上(预包被的)的特异性单抗捕获。去除细胞后,BEI捕获的细胞因子与生物素标记的单抗结合,其后再与碱性磷酸酶或辣根过氧化物酶标记的亲和素结合。加底物显色后,PVDF膜上出现紫色或红褐色的斑点表明细胞产生了细胞因子,酶联免疫斑点测定报价,通过酶联免疫斑点分析仪(ELISPOT Reader)对斑点的进行自动计数和分析。
荧光酶联免疫斑点测定
Biosys酶联免疫斑点测定产品特点
●专LI立体3D双光照明系统:
通过使用“光度”强度照明和渐变来区分真/假斑点,对于双色和荧光团来说,更精QUE的3D量化,增强斑点与背景的对比度,有效抑制板孔侧壁反光造成的“幻影现象”,提高检测精QUE度。唯YI能进行单斑点、每孔光密度测定以定量细胞YIN子分泌的照明系统。
● 彩色成像及分析系统:
高分辨率2340×2000 分辨率fire wire真彩数码成像系统,可进行双色或三色Elispot实验结果的检测。也适用于病毒斑(Viral
Plaque)、KE隆形成(CFU)、肿LIU细胞集落形成(HTCFA),干XI胞集落形成试验等。 数据量高达5M 的图像数据(单孔)﹑双色以上的图像分析功能, 一体化HP 20’ 液晶显示器.
●高精度X-Y定位载板台:
采用高精度齿轮步进电机,避免了皮带轮步进电机的打滑和老化,定位精度<0.01mm。
高精度微步进电机、齿轮传动方式、样品架移动精度< 0.01mm
●高灵敏性,高特异性的优点:
动态“像素周围识别”,模糊、弥散、过大、过小斑点以及高背景或不规则背景均可检测。
“自动边缘识别技术”,“动态背景识别” Bioreader不是采用一个固定的背景平均“洗去”值,对不规则背景有很大意义。
Bioreader自动识别和去除纤维, 还可以调节图像参数, 不同程度“洗去”背景,让背景和斑点颜色对比ZUI明显。
●高分辨率:
每孔可检测多至2000个斑点,直径>3μm 的斑点即可被有效检测(通常设定检测的斑点大小为20-50μm)。
所有Bioreader型号均配备5 MPixel相机,Bioreader-F-z-i可使用集成的显微变焦镜头提供多达200倍的放大倍率。如果用户需要更多印版格式并正在寻找便宜的变焦效果,则可选更多像素的相机,可以升级光学组件和摄像头
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