武汉贝科新肽公司-染色体原位杂交
预杂交
1)每个管中置换成大约300ulHYB-溶液,60℃水浴5分钟,避免振荡。
2)用等体积的HYB+取代HYB-。
3)60℃水浴,预杂交4小时以上。
杂交
1)吸去预杂交的HYB+,染色体原位杂交,加上100ul已加入探针的HYB+溶液(探针浓度约为1ng/ul)..
2)60℃ 温浴过夜。
注:杂交与预杂交的温度可以是55到60度不等,温度越低,探针结合越好,温度越高,背景越小。
原位杂交技术是一种在生物组织或细胞中定位DNA片段或RNA序列的重要生物技术,具有广泛的应用前景。该技术在医学、农业和工业等领域都有广泛的应用,可以帮助人们深入理解基因表达和遗传特征,为疾病的诊断和、品种的鉴定和遗传育种以及产品安全性和稳定性的检测提供有效手段。随着科技的不断发展,原位杂交技术的应用前景将更加广阔,为生命科学和医学等领域的研究提供更多可能性。
在研究DNA分子原理的基础上发展起来的一种技术。其基本原理是两条核苷酸单链片段,在适宜的条件下,能过氢键结合,形成DNA-DNA、DNA-RNA或 RNA-RNA 双键分子的特点,应用带有标记的(有性同位素,如3H、35S、32P、荧光素生物素、等非性物质)DNA或RNA片段作为核酸探针,与组织切片或细胞内待测核酸(RNA或DNA)片段进行杂交,然后可用自显影等方法予以显示,在光镜或电镜下观察目的 mRNA或DNA 的存在并定位
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