T细胞的ELISpot分析应用：

ELISpot是研究特异性免疫反应的敏感方法，能够区分活化的T细胞亚群。例如，Th1细胞产生干扰素-γ、IL-2和TNF-α，而Th2细胞产生其他细胞因子，如IL-4、IL-5和IL-13。例如，这被广泛应用于infectious disease、cancer、过敏和自身免疫性疾病的研究。

在vaccine研究中，ELISpot是一种标准工具，用于通过测量激发强大T细胞反应的能力(通常是干扰素-γ的分泌)来确定vaccine的有效性。基于ELISpot的诊断分析已经可用，包括一种通过测量T细胞对tuberculosis分枝Bacillus特定抗原的反应分泌干扰素-γ来检测tuberculosis病感染患者的测试。

酶联免疫斑点试验简介

酶联免疫斑点试验简介

随着酶联免疫分析技术在医学及生物学领域的广泛应用 ， 使体外检测各种细胞因子及Antibody研究有了新的突破。在研究免疫应答机制时以往常用用酶联免疫吸附法（ ELISA ）检测体液中游离的细胞因子（ CK ）或Antibody，但由于游离的循环Antibody或 CK 的半哀期不同，使之在体液中不断的被代谢或与target organ结合，而不能确切的反映体内的Antibody及 CK 的水平。 80 年代，国外的科研工作者根据 ELISA 技术的基本原理，建立了体外检测特异性Antibody分泌细胞和 CK 分泌细胞的固相酶联免疫斑点技术（ ELISPOT ）。因其具有较高的特异性和敏感性，目前正被国内外广泛应用，酶联免疫斑点试验报价，对探索自身免疫系统疾病发病机制具有重要意义。

酶联免疫斑点试验原理

将细胞置于包被有特异性Antibody的96孔板中培养，在有刺激的条件下，细胞分泌的细胞因子或免疫球蛋白会被包被Antibody捕获。移除细胞后，酶联免疫斑点试验，被capture的细胞因子可进一步使用生物素标记的二抗来标识，酶联免疫斑点试验哪家好，其后再与酶标记的亲和素作用，并加入底物使其呈色，酶联免疫斑点试验厂家，有反应作用的细胞会留下直径大小不等的stained spots。

1. 加入细胞到含有（或不含）刺激物中培养；

2. 阳性细胞开始分泌细胞因子，细胞因子就近被包被Antibody捕获；

3. 移出细胞，清洗板子，加入生物素标记的检测Antibody，形成“Antibody-抗原-Antibody”夹心结构；

4. 为了观察膜上斑点的形成，加入酶标记的亲和素；

5. 加入显色底物，在酶的催化分解下，生成不可溶的色素，就近沉淀在局部的膜上形成斑点；

6. 斑点计数（可用bioreader自动读板仪计数），数据处理，结果分析。

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