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PCR实验室管理细则规范:
试剂储存和准备区只能用于试剂的贮存和配置。
样品和标本处理区只能进行临床标本的保存,核酸提取、保存及其加入至扩增反应管,测定RNA时cDNA的合成。
扩增产物分析区只能进行DNA或cDNA扩增,实时荧光PCR扩增产物的分析。
PCR实验危险性较大,稍微不注意就可能造成事故的发生,所以在PCR实验室工作的人员要严格遵守上述规范。
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PCR实验室建设的几个关键点:
(1)平面布局:不论是组合式还是分散式布置的PCR实验室,各功能房间均宜设置独立缓冲间
(2)区域空气流向:为避免互相污染,PCR实验室空气流向必须严格遵循单一方向进行,即只能从试剂贮存和准备区→标本制备区→扩增反应混合物配制和扩增区→扩增产物分析区。
(3)通风空调:为避免交叉污染,各功能用房内空气不能掺混。混合式PCR实验室应采用新风直流空调系统,当采用新风系统有困难时,各区域的空气只能在自己的房间内循环。
(4)生物安全:按照实验室生物安全指南(第二版)的规定,2019-nCoV病原体暂按照第二类病原微生物进行管理,则样本植被区宜为负压或加强型P2实验室,核酸操作应在生物安全柜内进行。
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PCR实验室设计建设标准规范
各区域的功能与设备
试剂制备区主要为扩增试剂的准备,分装盒保存。主要设备有天平、冰箱、离心机、加样器、紫外灯。
样品制备区主要是样品的混样和测试样品的制备。其主要设备有冰箱、生物安全柜、离心机、加样器、振荡器、恒温水槽、上下水设备、废弃物容器、紫外灯。操作台是否使用生物安全柜、净化工作台,或工作台,要根据样品的性质和制备要求来决定,如疾控中心、临床医学实验室一般选择生物安全柜,植物、检疫等选择柜。
扩散区为pcr扩增反应系统的制备和模板的添加、核酸扩增。在生物安全柜(超净台)内进行加样,超净台气流方向宜选用垂直式。冰箱,生物安全柜,PCR实验室通风系统设计,离心加样装置,废物容器,紫外灯等。
扩增产物分析区为扩增产物的分析区域。如果只使用全自动扩增检测仪,可将扩增区与扩增产物分析区合并为一个区。本区域所使用的仪器设备有、、加样器和水浴箱等。
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