外泌体电镜检测:外泌体是细胞外囊泡的一种,其膜来源与粒径范围与细胞外囊泡相似,胞外囊泡粒径及浓度测试服务,电镜下,显示出典型的茶托状超微结构。
透射电镜作为鉴定外泌体的金标准,一直是科锐诺生物主营的业务之一。透射电镜点分辨率可以达到0.1nm,非常适合用来观察外泌体类囊泡。客户只需要寄送新鲜或者冻存的外泌体样品,我们负责从制片到观察的全套检测服务。经过多年实操与研发经验,科锐诺已经熟练掌握外泌体电镜检测。做过的样品来源包括:常规细胞上清、外周血、尿液、脑脊液、肺泡灌洗液、组织提取液、乳液、汗液等来源的外泌体。分离方法包括:PEG沉淀法、蔗糖密度梯度离心法、差速超1速离心法、色谱柱法、亲合法、超滤法、切向流、微流控等。对于不同来源,不同方法的样品,实验前,会进行详细沟通及结果预估。结合NTA数据,电镜效果非常可靠且可控。 测试周期为3-7个工作日。
实验室采用Zetaview(品牌:Particle Metrix)进行外泌体浓度粒径测试服务。其方法即纳米颗粒跟踪分析(Nanoparticle Tracking Analysis,NTA),原理是对每个颗粒的布朗运动进行追1踪和分析,结合Stockes-Einstein方程式计算出纳米颗粒的流体力学直径和浓度。NTA技术已被外泌体研究领域认可为外泌体表征手段之一;相较于其他表征方式,NTA技术的样本处理更简单、更能保证外泌体原始状态、检测速度更快。Zetaview包含的微电泳技术,也可进行zeta电位的检测。
目前配备为488nm波长的激光器,且搭配对应的滤光片,可以测量荧光抗1体标记的外泌体。
在透射电镜基础上,用外泌体标记蛋白对外泌体进行免1疫标记,利用胶体金标记出外泌体表面的特定抗原的位置。结合透射电镜形态学定性的特点,同时确定外泌体标记蛋白的位置。这样同时从形态学及免1疫学原理上验证外泌体。这样数据结果中既可以获得经典形态的外泌体,又可以定性及定位外泌体表面的标志蛋白。这样具有更充分的说服力。
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