为什么要提供GFP空载的对照图片？

（1）作为整个实验过程中的操作参照，可排除因实验操作而导致目的基因没有荧光信号的影响。

（2）作为载体体系的参照，BIFC，确认构建载体时所使用的载体是可正常表达荧光蛋白的。

拍摄时为什么有明场通道？

（1）显示细胞状态，有活力的细胞应该有正确且明显的细胞形态，变形或破碎的细胞说明此时细胞不是适状态或细胞已。

（2）显示荧光确实是细胞内蛋白表达的，而不是细胞碎片及杂质产生的杂光。

在进行亚细胞定位研究时，研究者通常会使用荧光标记技术。这种技术利用特殊的标记目标蛋白质或细胞成分，然后将与荧光染料连接起来，这样就可以在显微镜下观察到目标蛋白质或细胞成分的位置和动态。

在植物学研究中，亚细胞定位也被广泛应用于研究。通过将外源基因导入植物细胞，并利用亚细胞定位技术来确定这些基因在植物细胞中的表达位置，可以帮助科学家们理解这些基因的功能和作用机制。

总之，亚细胞定位是植物学研究中的一个重要领域。它可以帮助科学家们理解植物细胞的生物学特性和功能，同时也可以应用于研究和疾病等方面。随着技术的不断发展和进步，相信亚细胞定位技术将会在植物学研究中发挥越来越重要的作用。

为什么有的共定位图片中叶绿体通道是玫红色？

在拟南芥、、玉米、大麦、小麦等材料中，种植培养苗子时是正常接受光照的，叶片中含有大量叶绿体，而叶绿素在640nm左右的激发光下可产生红色的自发荧光。当在这些含叶绿体较多的受体材料中做共定位实验时，共定位marker一般为红色荧光（在560nm左右的激发光下），实验及共聚焦拍摄时两个波长通道的荧光互不影响，但视野下看着比较混淆，尤其叠加后二者不易分清，因此只是在颜色显示上将叶绿体自发荧光设置为玫红色，以显示和共定位marker的区别。

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