外泌体miRNA测序检测-武汉科锐诺生物(图)






外泌体的组成:外泌体主要含有融合蛋白和转运蛋白、热休1克蛋白(HSP 70)、CD类蛋白以及磷脂酶和其他脂质相关蛋白,但是不同来源的外泌体的组成有差异。

外泌体的提取方式:

1、离心法:此种方法得到的外泌体量多,但是纯度不足。

2、过滤离心:这种操作简单、省时,不影响外泌体的生物活性,但同样纯度不足。

3、密度梯度离心法:用此种方法分离到的外泌体纯度较高,但是前期准备工作繁杂

4、免1疫磁珠法:这种方法可以保证外泌体形态的完整,特异性高、操作简单,但生理性盐浓度会影响外泌体生物活性。

5、色谱法:此种方法分离出的外泌体大小均一,但设备特殊,应用不广泛。





NTA(Nanoparticle Tracking Analysis)技术已被外泌体研究领域认可为外泌体表征手段之一;本实验室所使用的仪器Zetaview包含的微电泳技术,外泌体miRNA测序检测,也可进行zeta电位的检测。目前配备为488nm波长的激光器,且搭配对应的滤光片,可以测量荧光抗1体标记的外泌体 。除外泌体以外,本实验室也接收微囊泡、脂质体、蛋白、生物纳米材料等样本。



如果癌细胞来源的外泌体进入单核细胞,通过外泌体内所含的TGF-β或前1列腺素E2等的作用,单核细胞会被诱导分化为髓源性免1疫抑制细胞。髓源性免1疫抑制细胞释放出IL-10等各种免1疫抑制分子,抑制免1疫细胞活化或抑制T细胞的诱导,从而抑制抗肿1瘤免1疫。癌细胞通过利用抑制免1疫细胞攻击自身这一机制,进而促进癌1症的发展。



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