应用于分子病理诊断的DNA测序技术有直接测序法和焦磷酸测序法。直接测序技术主要是Sanger等发明的双脱氧链末端终止法。其原理就是根据核苷酸在某一固定的点开始，随机在某一个特定的碱基处终止，产生A、T、C、G4组不同长度的一系列核苷酸，然后在尿素变性的PAGE胶上电泳进行检测，从而获得DNA序列。直接测序法是基因突变检测的“金标准”，其优点是结果准确，重复性好，可检测整个测序范围内已知和未知突变点;缺点是步骤多，耗时长，灵敏度低，过程不易控制，在检测已知突变位点方面将逐渐被荧光定量PCＲ法替代。

意义

在研究DNA分子原理的基础上发展起来的一种技术。其基本原理是两条核苷酸单链片段，植物基因组原位杂交检测技术服务，在适宜的条件下，能过氢键结合，形成DNA-DNA、DNA-RNA或 RNA-RNA 双键分子的特点，应用带有标记的（有性同位素，如3H、35S、32P、荧光素生物素、等非性物质）DNA或RNA片段作为核酸探针，与组织切片或细胞内待测核酸（RNA或DNA）片段进行杂交，然后可用自显影等方法予以显示，在光镜或电镜下观察目的 mRNA或DNA 的存在并定位；用原位杂交技术，可在原位研究细胞合成某种多肽或蛋白质的基因表达。此方法有很高的敏感性和特异性，可进一步从分子水平来探讨细胞的功能表达及其调节机制。已成为当今细胞生物学、分子生物学研究的重要手段。

结1核病是严重威胁人类健康的传1染性疾病，每年约有200万人死于该病，其死1亡率在传1染性疾病中仅低于艾1滋病，随着医1疗诊断技术的迅猛发展，结1核病病理诊断经历了单一形态学和联合特殊染色，到如今利用分子病理基因检测技术进行准确诊断的三个阶段。

　　我科早在全1国建立了系统性结1核病分子病理诊断技术的平台，率1先将分子病理诊断技术在结1核病中应用并推广，解决了传统病理对菌阴肺结1核及肺外结1核病的诊断率低、结1核病与非结1核分枝杆1菌病无法鉴别以及耐药结1核病无法诊断等难题。同时，我科作为中华医学会结1核病学分会金1牌病理培训基地，负责组织制定了结1核病病理诊断规范、培训了大量的专1业技术人员，为形成结1核病病理学综合诊治新模式做出了卓1越贡献!

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