荧光原位杂交-贝科新肽(在线咨询)-原位杂交







①细胞特异性mRNA转录的定位,可用于基因图谱,荧光原位杂交,基因表达和基因组进化的研究;②组织中病毒DNA/RNA的检测和定位,如EB病毒mRNA、人类状瘤病毒和巨细胞病毒DNA的检测;③癌基因、抑癌基因及各种功能基因在转录水平的表达及其变化的检测;④基因在染色体上的定位;⑤检测染色体的变化,植物原位杂交,如染色体数量异常和染色体易位等;⑥分裂间期细胞遗传学的研究,如遗传病的产前诊断和某些遗传病基因携带者的确定,某些的诊断和生物学剂量测定等。




原位杂交第二天

1.

1)将探针回收,放于-20C保存(通常探针可重复使用十次左右)。

2)加入50%甲酰胺/2XSSCT溶液1毫升,60℃,放置30分钟,重复一次。

3)置换2XSSCT1ml,60℃,放置15分钟。

4)置换0.2XSSCT1ml,60℃,放置30分钟,重复一次。

2.

1)用MABT洗两次,每次五分钟,放在摇床轻轻摇动。

2)室温下加1ml 1:2:7溶液,染色体荧光原位杂交,时间为一小时。

3)按1:3000的比例在1:2:7溶液中加入酶连,4C 冰箱过夜。






核酸原位杂交可根据其检测物而分为细胞内原位杂交和组织切片内原位杂交;根据其所用探针及所要检测核酸的不同又可分为DNA-DNA, RNA-DNA, RNA-RNA杂交。但不论哪种杂交都必须经过组织细胞的固定,预杂交,杂交,原位杂交,冲等一系列洗步骤及自显影或酶法显色以显示杂交结果。

我们在这儿介绍的是整胚原位杂交,不同于一般的在载片上对细胞和组织切片进行探针杂交及检测的原位杂交,




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