HE染色流程是什么,很多人都不知道,今天跟着小编一起来学习一下,切片的好坏直接影响疾病诊断的及时与准确性。因此一张高质量的HE染色切片,是实验室必须掌握的技术之一。HE染色目前在国内国外病理诊断上被
广泛采用,常规的染色方法。下面一起来看HE染色的基本顺序。一般切片的片子应在60-70度左右的烤箱中烘烤30分钟以才可以进行染色。总的来说是一个时间较长的过程。
1.样品制备
对于贴壁生长细胞,胰酶消化,调整细胞浓度约1×105/ml,滴加于盖玻片上(置于6孔板中),培养相应时间后,取出细胞爬片,用PBS 洗涤3次。2.样品固定 95%乙醇固定20min,PBS洗涤2次,每次1min。3.染核 苏mu
素染液染色2-3min,自来水洗涤。4.分色 镜下观察,若细胞核染色过深,用1%盐酸酒精溶液分色数秒,植物石蜡切片三维重构检测技术服务,自来水洗涤。 5.染胞质 浸入伊红染液染色1min,自来水洗涤。6.封片 吹干或自然晾gan细胞爬片后,中性树胶封片。
以上六点就是HE染色的基本步骤,大家可以参考一下哦
石蜡切片现在是临床中观察病理常见的一种方法,实践发现,切片过程中常常由于多方面的原因遇到困难,甚至导致制片失败,石蜡包埋对在制作石蜡切片过程中的常见问题做个介绍:
在临床上我们有时会发现,切片不成带,不知道什么原因,石蜡包埋给大家介绍以下原因:切片刀不够锋利,切片刀与蜡块的角度不当,石蜡硬度过大,黏度不够,我们可以重新磨切片刀,调整切片刀的角度,对过硬的蜡可以适当的加些,或更换熔点较低的石蜡重新包埋,然后迅速切片2。切片上出现裂纹常见原因:首先看下切片刀上是否有小缺口,或刀口不平整。2.刀口上是否有粘附有细微纤维(如毛发.纸或布丝等物。3.片的水温太高。4.包埋时石蜡冻结太慢。解决方法:①切片刀某处有缺口可调换刀口部位或重新磨刀。刀口上缺口过多且不平整,可先将刀锋垂直在磨刀石上轻轻磨数次然后按常规磨刀。②擦净刀口。③适当减少脱水、透明、浸蜡时间。④组织中硬性物质太多,则不宜用。⑤裱片的水温以45%C左右为宜。⑥包埋时待蜡块周围凝结一层,即放入冷水中
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