植物基因组原位杂交技术服务-科锐诺(推荐商家)






分子病理学是20世纪70年代初,随着疾病的细胞生物学和分子生物学的发展和相互渗透的一个病理学分支学科。分子病理学是应用分子生物学理论、技术和方法,研究疾病发生1发展过程中蛋白质和核酸水平变化对疾病发生过程的影响及其作用,探讨疾病发生的分子机制,揭示疾病本质的现代病理学的分支学科。深入进行疾病分子病理学研究,将为疾病的精1准诊断和精1准治1疗提供重要的科学依据。




滴加FITC-TSA:滴加FITC-TSA试剂,避光室温反应5min。后TBST洗3次×10min,PBS洗1次×5min。

DAPI复染核:切片滴加DAPI染液,植物基因组原位杂交技术服务,避光孵育8min,冲洗后滴加抗荧光淬灭封片1剂封片。

镜检拍照:切片于尼康正置荧光显微镜下观察并采集图像。(紫外激发波长330-380nm,发射波长420nm,发蓝光;FAM(488)绿光激发波长465-495nm,发射波长515-555 nm,发绿光;CY3红光激发波长510-560,发射波长590nm,发红光。)




原位杂交第三天

1) 用1ml含10%热灭清的MABT溶液置换溶液,放置摇床上25分钟,然后用1mlMABT置换,25分钟,再用1mlMABT溶液置换,一小时以上,后用1mlMABT溶液置换,25分钟。

2) 用1ml 1mM左旋米睉的Staining buffer洗三次,每次放置五分钟。

3)将胚胎转入十六孔板中,吸去staining buffer,加上300ul BM Purple AP Substrate(底物,用之前加5mM左旋米唑),十六孔板外面包上锡箔纸以避光,避免摇动,室温下显色。

4)每隔一小时观察胚胎是否开始显色

5)将显色完全的胚胎中的底物吸出,用PBST洗两三次后加上4%多聚甲醛固定,拍照。

6)4C冰箱保存。



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