分子病理技术服务-科锐诺(推荐商家)
滴加FITC-TSA:滴加FITC-TSA试剂,避光室温反应5min。后TBST洗3次×10min,PBS洗1次×5min。
DAPI复染核:切片滴加DAPI染液,避光孵育8min,冲洗后滴加抗荧光淬灭封片1剂封片。
镜检拍照:切片于尼康正置荧光显微镜下观察并采集图像。(紫外激发波长330-380nm,发射波长420nm,发蓝光;FAM(488)绿光激发波长465-495nm,发射波长515-555 nm,发绿光;CY3红光激发波长510-560,发射波长590nm,发红光。)
多彩色荧光原位杂交(multicolorfluorescenceinsituhybridization,分子病理技术服务,mFISH)。它用几种不同颜色的荧光素单独或者混合标记的探针进行原位杂交,能同时检测多个基因,扩大了FISH技术的临床应用。FISH技术目前主要应用于染色体和DNA水平上的病理诊断检测。染色体FISH主要检测染色体易位、缺失、重复、变异等;DNAFISH主要是检测基因突变、扩增、易位、缺失。与原位杂交技术相比,FISH更加安全、快速,特异性好、定位准确。
分子病理诊断在遗传性疾病的诊断和分型方面凸显特长,通过对患者染色体、基因的检测进行遗传病筛查和诊断,并可对家族遗传病的发生进行预测。目前,国内主要通过染色体核型分析、荧光原位杂交技术、荧光定量PCR技术等检测染色体畸形,辅助进行产前遗传性疾病的筛查。通过DNA直接测序、荧光定量PCR、免1疫组化技术等检测相关基因的结构、表达的变化,辅助进行神经系统、生殖系统等遗传性疾病的诊断。
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