植物组织原位杂交-武汉贝科新肽(图)







预杂交

1)每个管中置换成大约300ulHYB-溶液,60℃水浴5分钟,避免振荡。

2)用等体积的HYB+取代HYB-。

3)60℃水浴,预杂交4小时以上。

杂交

1)吸去预杂交的HYB+,加上100ul已加入探针的HYB+溶液(探针浓度约为1ng/ul)..

2)60℃ 温浴过夜。

 注:杂交与预杂交的温度可以是55到60度不等,温度越低,探针结合越好,温度越高,植物组织原位杂交,背景越小。




原位杂交技术在许多领域都有应用,以下是其中几个具体应用:

细胞生物学和发育生物学:在细胞生物学和发育生物学领域,原位杂交技术常被用于研究基因的表达和定位。例如,通过标记特定基因的探针,可以在细胞或组织中检测特定基因序列的存在和分布,进而了解基因在细胞分化、发育和功能中的作用。

基因组学和遗传学研究:原位杂交技术也可用于基因组学和遗传学研究。例如,通过标记多个基因探针,可以检测基因组中的多个基因序列,从而进行基因定位、基因表达谱分析、基因突变检测等研究。

病毒学和病原微生物研究:在病毒学和病原微生物学领域,原位杂交技术常被用于检测和定位病毒、细菌等病原微生物。例如,通过标记特异性或核酸探针,可以检测组织中病原微生物的存在、情况以及分布特征,从而为疾病的预防、诊断和提供依据。

总之,原位杂交技术在生物学、医学、基因组学、遗传学、病毒学和病原微生物学等领域都有广泛的应用价值,为人类认识生命现象、探究疾病机制和提供了有力的技术支持。






根据核酸探针标记物的种类分别进行自显影或利用酶检测系统进行不同显色处理。细胞或组织的原位杂交切片在显示后均可进行半定量的测定,如自显影可利用人工或计算机辅助的图象分析检测仪(computer-assisted image analysis)检测银粒的数量和分布的差异。非性核酸探针杂交的细胞或组织可利用酶检测系统显色,然后利用显微分光光度计或图像分析仪对不同类型和数量的核酸的显色强度进行检测。




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