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包埋是使浸透蜡的组织块包裹在石蜡中。

6.切片:切片前先将蜡块切面在冻台上冷冻几分钟,将所要切的包埋块固定在标本台上,使包埋块外切面与标本夹截面平行,植物石蜡切片技术服务,并让包埋块稍露出一截。将刀台推至外缘后松开刀片夹的螺旋,上好刀片,使切片刀平面与组织切面间呈15°左右的夹角,包埋块上下边与刀口平行。

在微动装置上调节切片要求的厚度(一般为4微米),调节时应注意指针不可在两个刻度之间,否则容易损伤切片机,将刀台移至近标本台处,让刀口与组织切面稍稍接触,这时就可以开始切片了。



切片经HE染色后,要脱水透明,才能用中性树胶封盖。he染色对于贴壁生长细胞,胰酶消化,调整细胞浓度约1×105/ml,滴加于盖玻片上(置于6孔板中),培养相应时间后,取出细胞爬片,用PBS 洗涤3次。着况与组织或细胞的种类有关。切片在苏mu素染液中停留过长;或切片太厚;或分化时间太短。这种情况首先镜下看看切片厚度(佳厚度1-2层细胞核),要么重新染色,要么重新制片。染色的终结果是:细胞核呈蓝色、胞质、肌纤维、胶原纤维和红细胞呈深浅不一样的红色,病理技术服务提醒:在进行HE染色需要染色时间,脱水,染色时间不一样,需要等 ,明确HE评判标准。



石蜡包埋切片实验基本步骤主要有以下几步:

1、取材:新鲜组织固定于4%多聚甲醛24h以上。将组织从固定液取出在通风橱内用手术刀将目的部位组织修平整,将修切好的组织和对应的标签放于脱水盒内。

2、脱水:将脱水盒放进吊篮里于脱水机内依次梯度酒精进行脱水。75%酒精4h-85%酒精2h-90%酒精2h-95%酒精1h-无水乙醇I 30min-无水乙醇II 30min-醇苯5-10min-I5-10min-II5-10min-蜡I1h-蜡II1h-蜡III 1h。

3、包埋:将浸好蜡的组织于包埋机内进行包埋。先将融化的蜡放入包埋框,待蜡凝固之前将组织从脱水盒内取出按照包埋面的要求放入包埋框并贴上对应的标签。于-20°冻台冷却,蜡凝固后将蜡块从包埋框中取出并修整蜡块。

4、切片:将修整好的蜡块置于石蜡切片机上切片,片厚4μm。切片漂浮于摊片机40℃温水上将组织展平,用载玻片将组织捞起,并放进60℃烘箱内烤片。待水烤干蜡烤化后取出常温保存备用。





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