提供酵母双杂交技术服务-武汉科锐诺生物(图)






意义

在研究DNA分子原理的基础上发展起来的一种技术。其基本原理是两条核苷酸单链片段,在适宜的条件下,能过氢键结合,形成DNA-DNA、DNA-RNA或 RNA-RNA 双键分子的特点,应用带有标记的(有性同位素,如3H、35S、32P、荧光素生物素、等非性物质)DNA或RNA片段作为核酸探针,与组织切片或细胞内待测核酸(RNA或DNA)片段进行杂交,然后可用自显影等方法予以显示,在光镜或电镜下观察目的 mRNA或DNA 的存在并定位;用原位杂交技术,可在原位研究细胞合成某种多肽或蛋白质的基因表达。此方法有很高的敏感性和特异性,可进一步从分子水平来探讨细胞的功能表达及其调节机制。已成为当今细胞生物学、分子生物学研究的重要手段。



原位杂交试验

收集斑马鱼的胚胎,提供酵母双杂交技术服务,在Holfretor水中培养,到达所需要的发育时期时,用蛋白酶去除卵膜,用4%多聚甲醛固定,在4℃保存,二十四小时后用50%2%多聚甲醛溶液洗,然后换成,在-20C 保存,待用(两天和两天以上的胚胎需要用处理,去除色素。或者使用苯锍脲稀溶液培养,可阻断色素的形成) 武汉科锐诺生物科技有限公司




20世纪80年代的DNA原位杂交开启了分子病理检测的大门,随后相继出现了在组织切片上的原位杂交,目的是检测肝1炎和肝1癌组织中的乙1肝1病毒。之后,越来越多的肿1瘤相关基因被发现,一批用于检测靶向治1疗药1物靶点的分子病理技术迅速问世,如FISH检测乳1腺癌HER2基因扩增、ARMS法检测肺1癌1基因突变等。



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