全自动核酸提取仪——磁珠法有什么特别之处?
磁珠法核酸自动提取仪是以磁珠为载体,利用磁珠在高盐低pH值下吸附核酸,在低盐高pH值下与核酸分离的特性,再通过移动磁珠或转移液体来实现核酸的整个提取纯化过程。
根据移液特点的不同,磁珠法核酸自动提取仪可分为抽吸式(也叫移液式)和磁棒式两种类型。前者因提取时间较长,且机械臂移液的设计造成设备体积较大、成本较高等因素,无法在商业上迅速推广。目前市场上使用较多的大部分是基于磁棒式的磁珠法核酸提取仪,也是本文介绍的重点。
全自动核酸提取仪如何操作呢?
核酸提取仪配套试剂及其操作步骤,买了仪器后一定要考虑后续使用配套试剂的问题:
1)配套试剂是否齐全。不同样本类型的提取试剂盒产品链是否完整
2)配套试剂是不是预封装。非预封装的试剂需要实验员用移液器加入裂解液、洗涤液和洗脱液等试剂,并没有减少人工操作时间;
3)提取前除了加样本外。是否需要添加蛋白酶K,由于有些公司并没有掌握裂解液中预封装蛋白酶K且常温储存的技术,蛋白酶K需要-20℃单独保存,需即用即加。每个样本多加一步蛋白酶K,96个样本多了10~15min左右的操作时间。
4)配套试剂的保存温度。有些厂家的提取试剂需要在2—8℃运输保存,冷链运输增加运输成本,保存需要在冰箱中,唐山全自动核酸提取仪器,而预封装提取试剂体积较大,在用量大特别像新冠这样大批量的使用,完全没有足够冰箱可以进行一段时间试剂的储存空间。
5)提取后的扩增效率。提取核酸时观察磁珠残留率并且检测提取核酸质量!
全自动核酸提取仪——原理介绍
磁珠法核酸提取仪的基本原理概括总结
1. 抽吸法,也叫移液法,是通过固定磁珠、转移液体来实现核酸的提取,一般通过操作系统控制机械臂来实现转移。提取过程如下:
1) 裂解:在样品中加入裂解液,全自动核酸提取仪器哪家好,通过机械运动及加热实现反应液的混匀及充分反应,全自动核酸提取仪器多少钱,细胞裂解,释放核酸。
2) 吸附:在样品裂解液中加入磁珠,充分混匀,利用磁珠在高盐低PH值下对核酸具有很强亲和力的特点,吸附核酸,在外加磁场作用下,磁珠与溶液分离,利用吸头将液体移出弃至废液槽,吸头弃掉。
3) 洗涤:撤去外加磁场,换用新吸头加入洗涤缓冲液,充分混匀,全自动核酸提取仪器生产厂家,去除杂质,在外加磁场作用下,将液体移出。
4) 洗脱:撤去外加磁场,换用新吸头加入洗脱缓冲液,充分混匀,结合的核酸即与磁珠分离,从而得到纯化的核酸。
2. 磁棒法
磁棒法是通过固定液体,转移磁珠来实现核酸的分离,原理和过程与抽吸法的一样,不同的是磁珠和液体分离的方式。磁棒法是通过磁棒对磁珠的吸附将磁珠从废液中分离开,放入下一步的液体中,实现核酸的提取。
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