胞外囊泡粒径及浓度检测-武汉科锐诺生物(图)
外泌体(Exosome)是活1细胞分泌的来源于晚期核内体(也称为多囊泡体)的膜性囊泡,存在于体液中,包括血液、唾液、尿液羊水等多种体液中,并携带有母细胞的多种蛋白质、脂类、RNA等重要信息,能作为信号分子传递给其他细胞从而改变其他细胞的功能,是细胞和细胞间信息传递的重要方式。
体液中外泌体 RNA(特别是 miRNA 等非编码 RNA)在健康与癌1症中存在明显 的表达差异。因此外泌体里的 miRNA 常常成为某些疾病的 biomarker。
样本准备
1. 提供外泌体悬液即可,未纯化样本也可以上机检测;
注意:NTA仅提供粒径分布情况和颗粒浓度,无法区分外泌体与非外泌体成分;当然也可先利用外泌体特异性标记物进行荧光标记,则可以获知外泌体特定亚群的含量。
2.仪器的检测区间是10^7 particles/ml,且有浓度检测下限,为10^5 particles/ml,进样量不少于2ml;一般来说,会对样本稀释后进样;
我司无法准确建议送样量;检测需要量与样本本身浓度有关,样本浓,则用量小,反之则多,根据检测经验,样本取用量一般在2μl-100μl不等,胞外囊泡粒径及浓度检测,取用量大于50μl时大多由于样本分泌量过低、提取失败或者对样本有过多稀释。一般建议送样量不低于30μl,如样本珍贵,可联系我司寄回,运费视具体情况收取。
外泌体介导细胞间的信号交流,是目前外泌体研究中十分热门的领域。外泌体中有丰富RNA以及蛋白,其中RNA的种类包括miRNA,LncRNA,mRNA等[1]。大量文献报道,这些RNA在细胞间的相互交流中发挥着巨大的作用。如,外泌体中miRNA可以调节下游细胞对胰岛素的敏感性。在研究中,作者培养脂肪组织巨噬细胞(ATM),并收集培养基中富含miR-155的外泌体,作用于下游的脂肪细胞和肌细胞。miR-155可以结合Argonaut蛋白,并募集下游的目标mRNA,从而影响细胞对胰岛素的敏感性和对葡萄糖的耐受性[2]。此外,外泌体中的LncRNA可以调控下游细胞的转录水平[3],mRNA、蛋白等可以通过外泌体转运至下游细胞,并在胞内进行翻译
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