直接法

将标记的特异性荧光，直接加在抗原标本上，经一定的温度和时间的染色，用水洗去未参加反应的多余荧光，室温下干燥后封片、镜检。

间接法

如检查未知抗原，先用已知未标记的特异（）与抗原标本进行反应，用水洗去未反应的，荧光定量，再用标记的抗（第二）与抗原标本反应，使之形成—抗原—复合物，再用水洗去未反应的标记，干燥、封片后镜检。如果检查未知，则表明抗原标本是已知的，待检为，其它步骤的抗原检查相同。

在进行亚细胞定位研究时，研究者通常会使用荧光标记技术。这种技术利用特殊的标记目标蛋白质或细胞成分，然后将与荧光染料连接起来，这样就可以在显微镜下观察到目标蛋白质或细胞成分的位置和动态。

在植物学研究中，亚细胞定位也被广泛应用于研究。通过将外源基因导入植物细胞，并利用亚细胞定位技术来确定这些基因在植物细胞中的表达位置，可以帮助科学家们理解这些基因的功能和作用机制。

总之，亚细胞定位是植物学研究中的一个重要领域。它可以帮助科学家们理解植物细胞的生物学特性和功能，同时也可以应用于研究和疾病等方面。随着技术的不断发展和进步，相信亚细胞定位技术将会在植物学研究中发挥越来越重要的作用。

GFP是绿色荧光蛋白，在扫描共聚焦显微镜的激光照射下会发出绿色荧光，从而可以地定位蛋白质的位置。绿色萤光蛋白（GFP）是一个由约238个氨基酸组成的蛋白质，从蓝光到紫外线都能使其激发，发出绿色荧光。通过基因工程技术，绿色萤光蛋白(GFP)基因能转进不同物种的基因组，在后代中持续表达，并且能根据启动子特异性地表达。

使用GFP必须构建融合蛋白载体，并在转染之后有效表达。这样，若在荧光显微镜下看到细胞内某一部位存在GFP信号，说明和GFP融合的蛋白也存在于该部位，这样就达到了确定某物质亚细胞定位的目的。

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