外泌体研究开展的如火如荼。不论是 SCI 文章的发表还是各类基1金的申请,外泌体相关研究表现都非常亮眼。外泌体提取后,研究人员面临的一个重要问题就是,我提取的是不是外泌体?如果是的话,质量如何?
现阶段,对外泌体进行鉴定主要有三种主流的方法:电镜、粒径和 Western blot 分析靶标物。之前我们已经对外泌体电镜进行了总结,外泌体NTA技术服务,今天我们来看看外泌体的粒径分析。
外泌体粒径分析原理
外泌体粒径分析方法为纳米颗粒跟踪分析(Nanoparticle tracking Analysis, NT A),其原理是对每个颗粒的布朗运动进行追1踪和分析,结合 Stockes-Einstein 方程式计算出纳米颗粒的流体力学直径和浓度。NT A技术已被外泌体研究领域认可为外泌体表征手段之一。相较于其他表征方式,NT A技术的样本处理更简单、更能保证外泌体原始状态、检测速度更快。
外泌体作为活1细胞分泌的含有RNA 和蛋白质的微囊泡,直径为 30-150nm之间,广泛分布于外周血、尿液、唾液、腹1水、羊水等多种体液中。研究表明,外泌体包含多种活性分子,如蛋白质、脂肪和核酸(mRNA、miRNA 及其它非编码RNA ) 等, 能作为信号分子传递给靶1细胞,介导细胞间的物质传递与信息交流,文献报道体液中外泌体 RNA (特别是miRNA 等非编码RNA)在不同的疾病模型中存在明显的表达差异。同时,这些分子被外泌体的脂膜所包裹和保护, 能保持其原有稳定性和生物学功能, 已经成为液体活检的重要分子标志物。近年来, 外泌体已成为科研热点,其在临床上巨大的应用价值, 引起了众多研究者以及商业人士的浓厚兴趣。随着相关技术的发展, 有关外泌体在临床疾病(尤其是肿1瘤)的早期诊断、治1疗、预后及伴随诊断的应用研究正在蓬勃开展。通过高通量技术对外泌体 RNA进行测序, 可快速高1效获得外泌体RNA 的全1面信息,是疾病诊断和随访的理想手段。
国际细胞外囊泡学会(ISEV) 在2014年的提议,对于提取获得的外泌体,需要通过以下手段进行确认:
双层囊膜结构是外泌体重要标志之一,但普通光学显微镜难以观察到此种亚显微结构。而透射电子显微镜 (Transmission electron microscope, TEM) 分辨率可达0.1 ~ 0.2 nm,可将被观察物体放大至数百万倍,非常适合进行外泌体双层囊膜超微结构观测。
表观生物技术团队拥有丰富的外泌体电镜样本处理与鉴定经验,可为客户提供高质量外泌体TEM检测服务,获得样本中外泌体典型形态特征图片 (如图一)。
外泌体NTA技术服务-科锐诺(在线咨询)由武汉科锐诺生物科技有限公司提供。武汉科锐诺生物科技有限公司是从事“外泌体,透射电镜,扫描电镜,石蜡切片等技术服务”的企业,公司秉承“诚信经营,用心服务”的理念,为您提供更好的产品和服务。欢迎来电咨询!联系人:王经理。