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考马斯亮蓝G-250法测定蛋白质含量的原理是什么
在酸性条件下，考马斯亮兰G-250染料与蛋白质疏水区结合，食用蓝色1号多少钱，导致da吸收峰由465 nm 变为595 nm，同时颜色也由棕色变为蓝色，该蓝色化合物颜色的深浅与蛋白质浓度的高低成正比关系。将蛋白质样品或稀释的BSA 与Bradford试剂混合，测量在595 nm处的吸收值，在建立由一系列稀释的BSA建立的标准曲线的情况下，蛋白质的浓度可以根据标准曲线而确定。
考马斯亮蓝G-250（Coomassie brilliant blue G-250）测定蛋白质含量属于染料结合法的一种。在游离状态下呈红色，da光吸收在488nm；当它与蛋白质结合后变为青色，蛋白质-色素结合物在595nm波长下有da光吸收。其光吸收值与蛋白质含量成正比，因此可用于蛋白质的定量测定。蛋白质与考马斯亮蓝G-250结合在2min左右的时间内达到平衡，食用蓝色1号价格，完成反应十分迅速；其结合物在室温下1h内保持稳定。
该法是1976年Bradford建立，试剂配制简单，操作简便快捷，反应非常灵敏，灵敏度比Lowry法还高4倍，可测定微克级蛋白质含量，测定蛋白质浓度范围为0～1 000μg/mL，xaio可测2.5μg/mL蛋白质，食用蓝色1号批发，是一种常用的微量蛋白质快速测定方法。
考马斯亮蓝有G250和R250两种。其中考马斯亮蓝G250由于与蛋白质的结合反应十分迅速，常用来作为蛋白质含量的测定。考马斯亮蓝R250与蛋白质反应虽然比较缓慢，但是可以被洗脱下去，所以可以用来对电泳条带染色。
名称
一般品名：食用青色1号
英文名：Brilliant Blue FCF
性状
本品为有金属光泽，带红色的紫色粉末或颗粒，徐州食用蓝色1号，无臭味。易溶于水，呈绿色蓝色溶液 ，溶于乙醇、甘油、丙二醇。耐光、耐热性强。对柠檬酸、酒石酸、碱均稳定。
制法
由邻磺酸与N-，N-（3-磺基芐基）-缩合后氧化制得）。
质量标准
项目
指标
GB 7655.1
FAO/WHO
FCC
日本食品添加物公定书
亮蓝60
亮蓝85
含量/%≥
60.0 85.0
85
85.0
85
干燥失重/%≤
10.0
15
15
10.0
氯化物、硫酸盐/%≤
1.0
15
15
4.0
水不溶物/%≤
0.3 0.2
0.2
0.20
0.20
萃取物/%≤
0.3
-
-
-
萃取物/%≤
-
0.2
0.4
-
副染料/%≤
6.0
6.0
6.0
合格
/%≤
0.0001
0.0003
0.0003
重金属/%≤
0.001
0.004
-
0.0004
铬/%≤
0.005
0.005
0.005
0.002
锰/%≤
0.005
-
-
0.005
铅/%≤
-
0.001
0.0010
0.005
隐色体/%≤
-
5.0
5.0
-
未结合中间体及副反应物邻、间、对磺基/%≤
-
1.5
1.5
-
芐基磺酸/%≤
-
0.3 0.3
-
铜、铬、锌、锑、钡硫酸盐/%≤
总芳伯胺/%≤
0.01
【应用】 根据我国《食品添加剂使用卫生标准》（GB2760-1996）中规定：亮蓝可用于果味型饮料（液、固体）、果汁型饮料、汽水、配制酒、糖果、糕点上彩装、红绿丝、罐头、浓缩果汁、青梅、对虾片，使用量为0.025g/kg；冰淇淋，使用量为0.021999g/kg。红绿丝的使用量可加倍；果味粉着色剂加入量按稀释倍数的50%加入。 英文名：BRILLIANT BLUE 产品标准编号：GB 7655.1 化学文摘号：CAS 3844-45-9 EINECS编号：EC223-339-8 分子式：C37H34N2O9S3Na2 化学名称：双[4-(N--N-3-磺酸苯甲基)氨基]-2-磺酸基二钠盐 规格：10kg 保质期为5年 【据中国《食品添加剂使用卫生标准》(GB2760－1996)规定：柠檬黄可用于果汁饮料、配制酒、糖果等食品而用量为0.1g/kg】 【使用方法】 将标准称量的本品置于容器中，逐渐加入适量温水，并不断搅拌使之全部溶解，所得溶液即可用于着色。 使用过程中应注意尽量避免或减少酸、碱、氧化剂、还原剂、金属离子、微生物等物质的不良影响，并注意避免受高温与暴晒，以防腿色或变色。 【运输及贮存】 运输时须防潮、遮阳、应贮存于干燥阴凉处、贮运过程中不得与有毒、有害物质混装、混运、混放。 【 其他狮头牌食用色素】 亮蓝、柠檬黄、苋菜红、番茄红、胭脂红、果绿、嫩叶绿、牛奶巧克力棕等18色食用色素。
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