石蜡包埋切片实验基本步骤主要有以下几步：

1、取材：新鲜组织固定于4%多聚甲醛24h以上。将组织从固定液取出在通风橱内用手术刀将目的部位组织修平整，将修切好的组织和对应的标签放于脱水盒内。

2、脱水：将脱水盒放进吊篮里于脱水机内依次梯度酒精进行脱水。75%酒精4h-85%酒精2h-90%酒精2h-95%酒精1h-无水乙醇I 30min-无水乙醇II 30min-醇苯5-10min-I5-10min-II5-10min-蜡I1h-蜡II1h-蜡III 1h。

3、包埋：将浸好蜡的组织于包埋机内进行包埋。先将融化的蜡放入包埋框，待蜡凝固之前将组织从脱水盒内取出按照包埋面的要求放入包埋框并贴上对应的标签。于-20°冻台冷却，线粒体三维重构测试服务，蜡凝固后将蜡块从包埋框中取出并修整蜡块。

4、切片：将修整好的蜡块置于石蜡切片机上切片，片厚4μm。切片漂浮于摊片机40℃温水上将组织展平，用载玻片将组织捞起，并放进60℃烘箱内烤片。待水烤干蜡烤化后取出常温保存备用。

贴片：切好的切片必须贴附于载玻片上才能作进一步处理，但是切片常有细小的横纹，必须经展平后才能贴附，否则影响染色和观察。首先将连串的切片投入到44℃左右（视蜡的熔点而定，此温度适合熔点为59℃左右的石蜡）的温水浴中，这时切片都浮在水面上，由于表面张力的作用使切片自然展平，用镊子将切片分开，然后用防脱玻片倾斜着插入水面去捞取切片，使切片贴附在载玻片的合适位置，于60℃ 烤箱烤片2个小时即可。

包埋是使浸透蜡的组织块包裹在石蜡中。

6.切片：切片前先将蜡块切面在冻台上冷冻几分钟，将所要切的包埋块固定在标本台上，使包埋块外切面与标本夹截面平行，并让包埋块稍露出一截。将刀台推至外缘后松开刀片夹的螺旋，上好刀片，使切片刀平面与组织切面间呈15°左右的夹角，包埋块上下边与刀口平行。

在微动装置上调节切片要求的厚度（一般为4微米），调节时应注意指针不可在两个刻度之间，否则容易损伤切片机，将刀台移至近标本台处，让刀口与组织切面稍稍接触，这时就可以开始切片了。



线粒体三维重构测试服务-科锐诺生物由武汉科锐诺生物科技有限公司提供。武汉科锐诺生物科技有限公司实力不俗，信誉可靠，在湖北 武汉 的技术合作等行业积累了大批忠诚的客户。科锐诺带着精益求精的工作态度和不断的完善创新理念和您携手步入辉煌，共创美好未来！