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HE染色流程是什么,很多人都不知道,今天跟着小编一起来学习一下,切片的好坏直接影响疾病诊断的及时与准确性。因此一张高质量的HE染色切片,是实验室必须掌握的技术之一。HE染色目前在国内国外病理诊断上被
广泛采用,常规的染色方法。下面一起来看HE染色的基本顺序。一般切片的片子应在60-70度左右的烤箱中烘烤30分钟以才可以进行染色。总的来说是一个时间较长的过程。
1.样品制备
对于贴壁生长细胞,胰酶消化,调整细胞浓度约1×105/ml,滴加于盖玻片上(置于6孔板中),培养相应时间后,取出细胞爬片,用PBS 洗涤3次。2.样品固定 95%乙醇固定20min,PBS洗涤2次,每次1min。3.染核 苏mu
素染液染色2-3min,自来水洗涤。4.分色 镜下观察,若细胞核染色过深,用1%盐酸酒精溶液分色数秒,自来水洗涤。 5.染胞质 浸入伊红染液染色1min,自来水洗涤。6.封片 吹干或自然晾gan细胞爬片后,中性树胶封片。
以上六点就是HE染色的基本步骤,大家可以参考一下哦
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切片经HE染色后,要脱水透明,才能用中性树胶封盖。he染色对于贴壁生长细胞,胰酶消化,调整细胞浓度约1×105/ml,滴加于盖玻片上(置于6孔板中),培养相应时间后,取出细胞爬片,用PBS 洗涤3次。着况与组织或细胞的种类有关。切片在苏mu素染液中停留过长;或切片太厚;或分化时间太短。这种情况首先镜下看看切片厚度(佳厚度1-2层细胞核),要么重新染色,要么重新制片。染色的终结果是:细胞核呈蓝色、胞质、肌纤维、胶原纤维和红细胞呈深浅不一样的红色,病理技术服务提醒:在进行HE染色需要染色时间,三维重构技术服务,脱水,染色时间不一样,需要等 ,明确HE评判标准。
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病理切片的制作步骤注意事项:
切片刀必须锋利,用力均匀,切片厚度3—5微米。切片完整无污染,无皱褶。
胃镜、穿刺等小活检组织切片必须作连续性切片,数量不得少于8张。
组织片贴附,应在除去标签位置后玻片的中间,各块组织的方向应一致。
封固前必须经酒精充分脱水,二甲1苯透明,湿封。
封片时不得有气泡,不得有树胶外溢。
标签必须贴于玻片左侧,编号字迹必须清楚。
取材后的制片工作一般应在2个工作日内完成。
切片完成后交付医师时必须按照记录当面清点。
切片是制片技能中要求很高的步骤,即使同一蜡块,使用同一台切片机,不同的操作者也会切出不同质量的片子。
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