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胞外囊泡粒径及浓度检测-武汉科锐诺生物(图)
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外泌体的基本信息:1983年,外泌体首1次于绵羊网织红细胞中被发现,1987年Johnstone将其命名为“exosome”,即外泌体。
人体几乎所有类型的细胞都能分泌外泌体,外泌体广泛存在并分布于各种体液中,携带多种蛋白质、mRNA、miRNA和脂质类物质等,作为重要的传递信号分子,形成了一种全新的细胞-细胞间信息传递系统,可参与细胞通讯、细胞迁移、血管新生和肿1瘤细胞生长等过程。
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外泌体作为活1细胞分泌的含有RNA 和蛋白质的微囊泡,直径为 30-150nm之间,广泛分布于外周血、尿液、唾液、腹1水、羊水等多种体液中。研究表明,外泌体包含多种活性分子,如蛋白质、脂肪和核酸(mRNA、miRNA 及其它非编码RNA ) 等, 能作为信号分子传递给靶1细胞,介导细胞间的物质传递与信息交流,文献报道体液中外泌体 RNA (特别是miRNA 等非编码RNA)在不同的疾病模型中存在明显的表达差异。同时,这些分子被外泌体的脂膜所包裹和保护, 能保持其原有稳定性和生物学功能, 已经成为液体活检的重要分子标志物。近年来, 外泌体已成为科研热点,其在临床上巨大的应用价值, 引起了众多研究者以及商业人士的浓厚兴趣。随着相关技术的发展, 有关外泌体在临床疾病(尤其是肿1瘤)的早期诊断、治1疗、预后及伴随诊断的应用研究正在蓬勃开展。通过高通量技术对外泌体 RNA进行测序,胞外囊泡粒径及浓度检测, 可快速高1效获得外泌体RNA 的全1面信息,是疾病诊断和随访的理想手段。
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NTA可以提供样本中颗粒的粒径分布和绝1对浓度,但不能够以NTA所提供的浓度数值这个单一的指标来定量外泌体。首先,我们必须理解NTA检测原理:该技术基于布朗运动,通过视频分析颗粒计数,可同时获取样本中颗粒的粒径和绝1对浓度。
因此,样本中的所有颗粒,都会被侦测并计入,而不能筛选出外泌体单独进行计数;同理:也不能通过NTA所提供的粒径分布情况这个单一的指标判断所提取出的内容物就是外泌体;例如下图为常见的粒径浓度分布图,可以说明所提取的内容物是在外泌体粒径范围内,但是否为外泌体还需要结合其他方法综合验证,譬如:透射电镜、western blot等。
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