荧光原位杂交技术-原位杂交-武汉贝科新肽(查看)







根据核酸探针标记物的种类分别进行自显影或利用酶检测系统进行不同显色处理。细胞或组织的原位杂交切片在显示后均可进行半定量的测定,如自显影可利用人工或计算机辅助的图象分析检测仪(computer-assisted image analysis)检测银粒的数量和分布的差异。非性核酸探针杂交的细胞或组织可利用酶检测系统显色,然后利用显微分光光度计或图像分析仪对不同类型和数量的核酸的显色强度进行检测。




植物组织原位杂交技术在植物基因表达和调控研究中具有广泛的应用。它可以用来研究植物发育、生长、逆境响应等方面的基因表达模式和调控机制。例如,可以利用该技术研究植物中的转录因子、信号转导通路、代谢途径等基因的表达和调控。此外,植物组织原位杂交技术还可以用来鉴定植物中的病原体、检测植物等方面。

总之植物组织原位杂交技术是一种重要的分子生物学技术,可以用来研究植物基因的表达和调控。它具有操作简便、结果可靠、应用广泛等优点,是植物分子生物学研究中不可或缺的工具。






一. 原位杂交天

1. 重新水化和固定

1) 吸取固定好的胚胎,荧光原位杂交,加入50%的PBST溶液,放置5分钟。

2) 置换成30%的PBST溶液,放置5分钟

3) 置换成PBST溶液,荧光原位杂交技术,放置5分钟,重复一次

4) 置换成4%多聚甲醛的PBS溶液固定20分钟

5) 用PBST洗两次,每次放置五分钟,室温。

 蛋白酶处理与后固定(本实验不做此步)

1) 用10ul/ml的蛋白酶K在室温下处理胚胎。5体节以下的胚胎不处理,5体节到24小时的胚胎处理3分钟,24小时以上的胚胎处理5分钟或者更长。发育时间越短的胚胎越嫩,可以不用或者少用蛋白酶处理,原位杂交服务,发育时间长的胚胎就需要用蛋白酶来疏松组织,原位杂交,以便于杂交。

2) 用PBST溶液轻洗,在PBST中放置5分钟。

3) 用4%多聚甲醛的PBS溶液固定20分钟,室温。

4) 用PBST洗两次,每次放置五分钟,室温。






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