
湖北染色体原位杂交-武汉贝科新肽科技公司(图)








FISH技术的基本步骤包括探针制备、样品预处理、探针与样品的杂交、信号检测和图像分析等。在探针制备过程中,使用荧光标记物代替同位素标记物来标记探针。在样品预处理过程中,细胞或组织的固定、裂解和去除非特异性蛋白质等操作都是必要的,以提高探针与目标序列的亲和力和特异性。在探针与样品的杂交过程中,探针与样品中的目标序列进行互补性杂交,形成可检测的荧光信号。在信号检测和图像分析过程中,使用高灵敏度荧光显微镜检测荧光信号并获取高分辨率的细胞图像。

DNA 探针为原位杂交提供较高的灵敏度。与RNA探针相比,DNA探针与靶mRNA 分子的杂交强度较弱,因此在杂交后的洗涤中不应使用甲醛。
探针特异性至关重要。如果已知细胞中mRNA或DNA的确切核苷酸序列,则可据此设计高度的互补探针。如果超过 5% 的碱基对不互补,那么探针只能与靶序列发生轻度杂交。这意味着,探针更容易在洗涤和检测步骤中被洗去,可能无法正确检测。
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