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考马斯亮蓝染色方法

马斯亮蓝染色是用考马斯亮蓝进行蛋白质染色的方法。考马斯亮蓝是一种阴离子染料， 常用考马斯亮蓝G250和R250。考马斯亮蓝 G250在游离状态下呈红色，当它与蛋白质 通过疏水结合后变为蓝色，蛋白质-色素结 合物在595nm波长下有da光吸收。其光 吸收值与蛋白质含量成正比，因此可用于蛋白质的定量测定。 考马斯亮蓝G250染色可以同时固定和染色，因此能立即观察显色结果，可用来确定电泳时间，观察初步结果。考马斯亮蓝R250染色灵敏度比G250髙得多，但对酸溶蛋白、醇溶蛋白不合适，因为在染色过程中，蛋白质会溶解在染色液或脱色液中。可用于SDS-PAGE 或非变性PAGE蛋白电泳的快速染色，或Western转膜后PAGE胶上残余蛋白的检测。

山东富舜新材料科技有限公司座落在美丽的“泉城”济南。公司是集化学科研、开发、生产、销售、服务为一体的综合型企业。我公司拥有的生产设备，完善的产品检测手段和体系。我公司的员工具有较强的责任感。经过多年的发展，现已形成添加剂、阻燃剂、和化工助剂三大类上百个品种。公司本着“诚信经营、专注品质”的宗旨，参与到激烈的市场竞争中来，以好的产品质量，优惠的产品价格，令人满意的销售服务，赢得大家的支持与信赖。山东富舜新材料科技有限公司的诚信、实力和产品质量获得业界的认可。欢迎各界朋友莅临参观、指导和业务洽谈。

考马斯亮蓝法测定蛋白质含量流程：

该方法用于大多数蛋白质的定量是比较精que的，但不适用于小分子碱性多肽的定量。如核糖核酸酶或溶菌酶。去污剂的浓度超过0．2%影响测定结果。如TritonX-100、SDS、NP-40等。

1．Bradford浓染液的配制：将100mg考马斯亮蓝G-250溶于50ml 95%乙醇，加入100ml85%的磷酸，然后，用蒸馏水补充至1000ml，此染液放4℃至少6个月保持稳定。

2．标准曲线蛋白质样本的准备：尽量使用与待测样本性质相近的蛋白质作为标准品，例如测定抗ti，可用纯化的抗ti作为标准。如果待测样本是未知的，也可用抗ti作为标准蛋白。通常在20ug—150ug/100ul之间绘制标准曲线。

3．将待测样本溶于缓冲溶液中，该缓冲溶液应与制作标准曲线的缓冲溶液相同(hao用PBS)。

4．按1：5用蒸馏水稀释浓染料结合溶液，如出现沉淀，过滤除去。

5．每个样本加5ml稀释的染料结合溶液，作用5～30min。染液与蛋白质结合后，着色剂亮蓝批发，将由红色变为蓝色，在595nm波长下测定其吸光度。注意，显色反应不得超过30min．

6．根据标准曲线计算待测样本的浓度。

【复合着色剂的使用】根据需要，可将本品与本公司生产的其他色泽的着色剂按适当比例配制各种不同的颜色。

在使用本公司配置号的复合食品着色剂时，着色剂亮蓝价格，应确保按本品标签上的配料提示所涉的各单色品种都在GB2760使用范围内，按所列单色着色剂的品种等比例的方法确定使用量（本使用说明列举的使用范围和使用量是指各单色品种均能使用的范围和使用量）

【使用方法】

将标准称量的本品置于容器中，逐渐加入适量温水，着色剂亮蓝供应商，并不断搅拌使之完全溶解，拉萨着色剂亮蓝，所得溶液即可用于着色。

使用过程中应注意尽量避免或减少酸、碱、氧化剂、还原剂、金属离子、微生物等物质的不良影响，并注意避免受高温与暴晒，以防腿色或变色。

【运输及贮存】

运输时须防潮、防晒、应贮存于干燥阴凉处、贮运过程中不得与有毒、有害物质混装、混运、混放。

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