原位杂交是一种生物学技术，它可以在细胞或组织中特定部位检测DNA或RNA的存在，而不需要将DNA或RNA分离出来。这项技术使用标记的DNA或RNA探针，与细胞或组织中的相应DNA或RNA进行特异性结合，然后通过光学显微镜或电子显微镜观察探针的位置和数量。

原位杂交的原理很简单。DNA或RNA分子具有互补的核苷酸序列，因此可以通过氢键相互结合。将标记的DNA或RNA探针与细胞中的DNA或RNA进行杂交，可以特异性地检测这些探针的位置和数量。探针的数量和位置可以反映DNA或RNA在细胞中的水平和分布。

原位杂交技术(In situ hybridization，ISH)是分子生物学、组织化学及细胞学相结合而产生的一门新兴技术，始于20世纪60年代。1969年美国耶鲁大学的Gall等(1969)首先用爪蟾核糖体基因探针与其卵母细胞杂交，将该基因进行定位，与此同时Buongiorno—Nardelli和Amaldi等(1970)相继利用同位素标记核酸探针进行了细胞或组织的基因定位，从而创造了原位杂交技术。自此以后，由于分子生物学技术的迅猛发展，特别是20世纪70年代末到80年代初，染色体原位杂交，分子、质粒和噬菌体DNA的构建成功，为原位杂交技术的发展奠定了深厚的技术基础。

原位杂交第二天

1.

1）将探针回收，放于－20C保存(通常探针可重复使用十次左右)。

2）加入50%甲酰胺/2XSSCT溶液1毫升，60℃，放置30分钟，重复一次。

3）置换2XSSCT1ml，60℃，放置15分钟。

4）置换0.2XSSCT1ml，60℃，放置30分钟，重复一次。

2.

1）用MABT洗两次，每次五分钟，放在摇床轻轻摇动。

2）室温下加1ml 1：2：7溶液，时间为一小时。

3）按1：3000的比例在1：2：7溶液中加入酶连，4C 冰箱过夜。

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