样本准备

1. 提供外泌体悬液即可，外泌体电镜测试服务，未纯化样本也可以上机检测；

注意：NTA仅提供粒径分布情况和颗粒浓度，无法区分外泌体与非外泌体成分；当然也可先利用外泌体特异性标记物进行荧光标记，则可以获知外泌体特定亚群的含量。

2.仪器的检测区间是10^7 particles/ml，且有浓度检测下限，为10^5 particles/ml，进样量不少于2ml；一般来说，外泌体电镜技术服务，会对样本稀释后进样；

我司无法准确建议送样量；检测需要量与样本本身浓度有关，样本浓，则用量小，反之则多，根据检测经验，样本取用量一般在2μl-100μl不等，取用量大于50μl时大多由于样本分泌量过低、提取失败或者对样本有过多稀释。一般建议送样量不低于30μl，外泌体电镜检测，如样本珍贵，可联系我司寄回，运费视具体情况收取。

NTA可以提供样本中颗粒的粒径分布和绝1对浓度，但不能够以NTA所提供的浓度数值这个单一的指标来定量外泌体。首先，我们必须理解NTA检测原理：该技术基于布朗运动，通过视频分析颗粒计数，可同时获取样本中颗粒的粒径和绝1对浓度。

因此，样本中的所有颗粒，外泌体电镜，都会被侦测并计入，而不能筛选出外泌体单独进行计数；同理：也不能通过NTA所提供的粒径分布情况这个单一的指标判断所提取出的内容物就是外泌体；例如下图为常见的粒径浓度分布图，可以说明所提取的内容物是在外泌体粒径范围内，但是否为外泌体还需要结合其他方法综合验证，譬如：透射电镜、western blot等。

外泌体是指包含了复杂 RNA 和蛋白质的小膜泡 (30-150nm)，现今，其特指直径在40-100nm的盘状囊泡。1983年，外泌体于绵羊网织红细胞中被发现， 1987年Johnstone将其命名为“exosome”。多种细胞在正常及病理状态下均可分泌外泌体。其主要来源于细胞内溶酶体微粒内陷形成的多囊泡体，经多囊泡体外膜与细胞膜融合后释放到胞外基质中 。

所有培养的细胞类型均可分泌外泌体，且外泌体天然存在于体液中，包括血液、唾液、尿液、脑脊液和乳1汁中。 有关他们分泌和摄取及其组成、“运载物”和相应功能的精1确分子机制刚刚开始研究。 外泌体被视为特异性分泌的膜泡，参与细胞间通讯，对外泌体的研究兴趣日益增长，无论是研究其功能还是了解如何将其用于微创诊断的开发。

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